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(4)培养20小时后,观察到平板上有各种形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有________种细菌,一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越________。 (5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐________细菌,这种培养基被称为__________________________________。 多 高 盐(或NaCl) 选择培养基 解析 (1)不同的培养基都含有基本成分:水、无机盐、碳源、氮源。所以培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源、碳源,除此之外,培养基还必须含有的基本成分是水和无机盐。(2)对培养基灭菌常采用的方法是高压蒸汽灭菌,对培养皿进行灭菌采用的方法是干热灭菌法。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养,培养的温度设定在37 ℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验。(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,其总数越多,说明湖水样品中有多种细菌,污染程度越重。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐盐细菌,这种培养基被称为选择培养基。 1.快速确认两类培养基 (1)鉴别培养基:加入的物质起“鉴别”作用(该物质可能与被鉴别菌种发生特殊颜色反应),该物质加入后并未杀死其他微生物,其培养基中可生存多种微生物。 (2)选择培养基:加入的物质起“筛选”作用,该物质可抑制或杀死其他微生物,只有被选择的“目的菌种”才能生存下来。 2.平板划线法只适用于微生物的提纯,不适合进行计数,并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。 3.倒平板的温度一般在50 ℃左右适宜,温度过高会烫手,温度过低培养基又会凝固。 4.平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又防止皿盖上的水珠落入培养基,造成培养基污染。 5.(2014·四川卷,10)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是______________________________。 (2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和______________,这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。 (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。 ①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始 氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖 细胞分裂素 母液 接种环 (4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_____________________________,该实验设计是否合理?为什么?________________________。 目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理,缺少空白对照 关注两种对照组与一种重复组 (1)将一未接种的选择培养基与接种的选择培养基一起培养——用于确认培养基灭菌是否彻底(制备是否合格); (2)将一接种的普通培养基与接种的选择培养基一起培养——用于确认选择培养基是否起到“筛选”作用; (3)进行微生物计数时,每一稀释度下涂布三个平板,即设置重复组,是为了求平均值,提高计数准确度。 本考点在教材中占篇幅很小,作为一个相对独立的课题呈现,但近年高考却多有涉及,主要考查点集中于针对不同材料的植物芳香油提取技术、方法,尤其对胡萝卜素提取、分离考查更多,备考时宜将各类提取技术方法作横向对比。 考点三 植物芳香油的提取 1.依据植物有效成分的特性选择提取方法 (1)提取挥发性强的植物芳香油:______法,如__________(从橘皮精油、玫瑰精油、胡萝卜素中选)。 (2)提取易溶于有机溶剂的植物有效成分:____________法,如_______________(从橘皮精油、玫瑰精油、胡萝卜素中选)。 (3)提取原料中含量高的植物有效成分:_____________法,如______________(从橘皮精油、玫瑰精油、胡萝卜素中选)。 蒸馏 玫瑰精油 萃取 胡萝卜素 压榨 橘皮精油 ■考点再现 2.植物芳香油提取实验流程设计 (1)玫瑰精油提取的实验流程 (2)橘皮精油提取的实验流程 石灰水浸泡
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