二茂铁催化鲁米诺电致化学发光反应的研究刘传之钱柯君杨敏丽.PDF

第? 卷 分析化学 （-BAIS 6T/ITB ）! 研究报告 第8 期 ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ##) 年8 月 .U’2F(F V312O4 3W /2O4XY’LO4 .UF+’(YX = ? 二茂铁催化鲁米诺电致化学发光反应的研究 刘传之! 钱柯君! 杨敏丽! 何品刚! 方禹之# （华东师范大学化学系，上海###$ ） 摘! 要! 在碱性%’( 缓冲体系中，鲁米诺与过氧化氢的电致化学发光反应要在)*#+, 以上的电位下才可以 发生，加入羧基二茂铁（-./ ）可以使这一发光反应的起始电位负移，而且发光信号随电极电位的增大而急剧 增强。详细考察了这一催化发光体系，研究了影响发光强度的各种因素，建立了01+’234 5 6 7 5-./ 发光体 系测定-./ 的电致化学发光新方法。方法测定二茂铁的检出限可达89 * 2+34: 0 ，二茂铁浓度在*9 # ; 8# = 9 # ; 8# ) +34: 0 范围内与电致化学发光强度呈良好的线性响应关系。 关键词! 鲁米诺，羧基二茂铁，电致化学发光 ! 引 言 化学发光（.0 ）分析法是一种高灵敏度的分析方法，它已被广泛应用于各种物质的测定。电致化学 发光（B.0 ）分析是通过电极反应而诱导化学发光的一种分析方法，它比一般的化学发光分析具有更高 的灵敏度和更好的选择性，而且可以实现原位分析，特别适合于那些因反应物不稳定而无法进行的化学 ［8 ) ］ 发光分析。近年来B.0 在生物分析领域，尤其在免疫分析和核酸杂交分析 方面的应用已日益引起 人们的关注。鲁米诺（41+’234 ）的化学发光分析已有很多报道。但它在电致化学发光分析方面的应用 C ［* ］ C ［$ ］ C ［@ ］ 则较少报道。有人曾报道用.3 ，.1 和A’ 催化01+’234 的B.0 反应，从而对这些物质进行 了的电致化学发光测定。本文研究发现，在%’( 体系中并有6 7 存在时，01+’234 在一定的电位下可 以产生电致化学发光反应，而羧基二茂铁（-./ ）可以催化这一反应。它的加入不仅使这一发光反应的 信号极大地增强，而且使发光反应的起始电位负移，从而有效地消除因01+’234 本身在较高电位下产生 发光而造成的背景信号，使灵敏度和检出限得到改善。方法可用于-./ 的测定，检出限为89 * 2+34: 0 。 由于-./ 可用来标记生物大分子，因此，本法可进一步应用于电致化学发光免疫分析和核酸杂交分析。 # 实验部分 # 9 ! 仪器及试剂 自制电致化学发光分析仪（如图8 ），包括==# 型发光检测仪（上海容圣生物电子有限公司）；D3EF4 8@? 恒电位仪（美国BGHG 公司）；I-J K/ 超低频信号发生器（宁波东风电子仪器厂）；D#/58## 型函 数纪录仪（上海大华仪表厂）。 铂片（# 9 * L+ ; 89 # L+ ）为工作电极，铂丝为对电极，/M: /M.4 （饱和N.4 ）电极为参比电极；化学发 光池： 8 L+ 比色皿。 01+’234 储备液：89 # ; 8# ? +34: 0 称取# 9