三种脂质体介导的花鲈胚胎干细胞转化效率的比较.PDFVIP

三种脂质体介导的花鲈胚胎干细胞转化效率的比较.PDF

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三种脂质体介导的花鲈胚胎干细胞转化效率的比较

! 第! 卷第# 期 水! 产! 学! 报 /012 ! ,02 # ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! $# 年%$ 月 #$%’( #) )*+,-%*-+ #) .,*’ 3452 ,$# 文章编号:% ’ #%( ($# )( ’ )$% ’ # 三种脂质体介导的花鲈胚胎干细胞转化效率的比较 % ,$ $ ,! $ 叶寒青 ,! 陈松林 ,! 沙珍霞 (%2 中国海洋大学海洋生命科学学院,山东青岛! $##! ; $ 2 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,山东青岛! $##) %; !2 上海水产大学-6研究院,上海! $, ) 摘要:通过! 种脂质体(C4A4D 8774@ ,C4A4DE954 和74F8?45F4A4 )介导绿色荧光蛋白基因转化花鲈胚胎干细胞,探 讨不同脂质体介导的花鲈胚胎干细胞((-+% )的转化效率,以及影响外源基因转化效率的因素,如细胞接种时 间、初始接种密度、3’ 和脂质体用量以及它们之间的比例等。实验发现,C4A4D 8774@ 转化(-+% 细胞效率最 高,适合于该细胞系的转化。对于同一种脂质体,3’ 与脂质体用量的比例对于绿色荧光蛋白基因转化 (-+% 最为重要,3’ 与C4A4D 8774@ 的比例为%- # 时,转化效率最高,为$) 2 !G ;3’ 与C4A4DE954 的比例为 %- * 时,转化效率最高,为%$ 2 %G ;而3’ 与74F8?45F4A4 的比例为%- ! 时,转化效率达到最高,为( 2 !G 。随 着3’ 、脂质体量的增加,转化效率有所提高,但达到一定的用量后,转化效率反而下降。 关键词:花鲈;脂质体;绿色荧光蛋白;胚胎干细胞;转化效率 中图分类号:+ ,%) 文献标记码:’ !#$%’() * +**’,’+),- * ./++ 0’$(#+( #+1’%.+1 .%)(*#%.’) . +#2-)’, (.+# ,+00( 1+’3+1 *# !#$%’() * + %,-./0 H- ,8A69AC%,$ ,.,- +0AC619A$ ,! ,+,’ I;4A6J98$ (%! #$$%% #’ ()*+,% -+’ % ./+%,/% ,0/%), 1,+2%*3+45 #’ 6+,) ,7+,8)#9 $##! ,6+,) ; $! :%5 -); ’ #* .34)+,);$% 14+$+=)4+#, #’ ()*+,% +36%*+%3 ?%3#*/%3 ,(+,+34*5 #’ @*+/$4*% , A%$$#B .%) +36%*+%3 ?%3%)*/6 C,34+44% ,6+,%3% @/)8%D5 #’ +36%*5 ./+%,/%3 ,7+,8)#9 $##) %,6+,) ; !! @E)

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