药物分析03（光谱法）.pptVIP

基本要求 掌握紫外-可见分光光度法的基本原理，朗伯-比尔定律及影响因素，定性、定量分析方法。 掌握红外光谱产生的基本原理以及一些典型基团的红外吸收光谱特征；了解红外光谱在有机化合物结构分析中的应用。 了解荧光分析法的基本原理及其在药物分析中的应用。 了解紫外-可见、荧光、红外分光光度计的基本构成与主要部件。 掌握薄层色谱法的基本原理、特点及定性、定量分析方法。 掌握气相色谱法的基本原理，色谱流出曲线及有关术语，相对保留值的含义，色谱峰区域宽度的表示、分配系数；掌握定性、定量分析方法。 掌握物质分离的条件；掌握分离度R与塔板数n、柱长L的关系及有关计算。 掌握高效液相色谱法的基本原理、特点及定性、定量分析方法。 了解气相、液相色谱仪的基本构成。 §3.1光谱分析 §3.1.1紫外-可见分光光度法 根据物质对波长为200～760 nm波长范围的光吸收特性所建立的一种定性、定量和结构分析的方法。 紫外-可见吸收光谱 分子的价电子吸收了光的能量， 由低能量的基态跃迁到高能量的激 发态，在相应波长位置出现吸收带 形成的光谱，称为紫外-可见吸收光 谱 光吸收定律适用范围 （1）只适用于浓度小于0.01moL.L-1的稀溶液，浓度过高吸收质点间不再是相互独立无关，会发生相互作用，导致K发生改变，使吸光度A和浓度C之间的关系不再是线性的，一般T值浓度变高，A增长变慢，以A、C为坐标的直线偏向浓度轴。 （2）严格讲，只适用于单色入射光，而完全严格的单色光并不存在，所以入射光单色性越好，则吸收定律适用性就越好，单色性差造成的吸收偏高是由于吸收物质对不同波长吸收程度不同引起的。 （3）只适用于均匀透明溶液。溶液中若存在胶体或悬浮颗粒，将会产生丁达尔散射，使透射光强非吸收性减弱，造成假吸收，从而偏离吸收定律。 （4）只适用于被测组分稳定的溶液，如果被测组分发生改变，显然会影响到吸收程度，若被测组分稳定时间有限，则测定必须在组分稳定时间内进行。 （5）在一定条件下也适用于红外等其它波长的光，适用于气体和透明液体。 (三)影响紫外可见吸收光谱的因素 共轭效应、异构现象、空间异构、助色效应、溶剂效应、pH值、超共轭效应等 三、影响荧光强度的因素（一）荧光的产生与分子结构的关系 1.分子产生荧光必须具备的条件 （1）具有合适的结构； （2）具有一定的荧光量子产率。 荧光量子产率（?）： 荧光量子产率与激发态能量释放各过程的速率常数有关，如外转换过程速度快，不出现荧光发射； 2.化合物的结构与荧光（内部因素） 内部因素：共轭效应、取代基类型和位置、电子跃迁类型、刚性结构和共平面效应等 （1）跃迁类型：?* → ?的荧光效率高，系间跨越过程的速率常数小，有利于荧光的产生； （2）共轭效应：提高共轭度有利于增加荧光效率并产生红移 （3）刚性平面结构：可降低分子振动，减少与溶剂的相互作用，故具有很强的荧光。如荧光素和酚酞有相似结构，荧光素有很强的荧光，酚酞却没有。 （4）取代基效应：芳环上有供电基，使荧光增强,反之减弱。 （二）、影响荧光强度的外部因素 1.溶剂的影响 除一般溶剂效应外，溶剂的极性、氢键、配位键的形成都将使化合物的荧光发生变化； 2.温度的影响 荧光强度对温度变化敏感，温度增加，外转换去活的几率增加。 3. 溶液pH 对酸碱化合物，溶液pH的影响较大，需要严格控制； 4.内滤光作用和自吸现象 内滤光作用：溶液中含有能吸收激发光或荧光 物质发射的荧光，如色胺酸中的重铬酸钾； 自吸现象：化合物的荧光发射光谱的短波长端与其吸收光谱的长波长端重叠，产生自吸收；如蒽化合物。 5.溶液荧光的猝灭 碰撞猝灭；氧的熄灭作用等。 除此之外，还有散射光、表面活性剂、共存物质的干扰等。 01：78、含有某一发色团的药物，最 大吸收波长为230nm，其跃迁类型为 A、σ→σ* B、π→π* C、 n →π* D、 n →σ* E、以上跃迁类型都可能 例1、摩尔吸收系数的表示符号是 A、 B、ε C、α D、 n E、 Ka 例2、可见一紫外分光光度法测定的药 物分子具有吸收特性的电磁波范 围是 A、10～