微卫星标记在长牡蛎三倍体鉴定中的应用.PDF

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 微卫星标记在长牡蛎三倍体鉴定中的应用 姜 群 李 琪 于 红 孔令锋 中国海洋大学水产学院海水养殖教育部重点实验室山东 青岛 摘要 为开发一种简单有效的倍性检测方法对长牡蛎三倍体诱导结果进行准确评估本实验 采用细胞松弛素抑制第二极体释放诱导产生长牡蛎三倍体选用 个微卫星位点扩增基因 组通过亲子代基因分型进行倍性检测检测结果采用流式细胞仪加以验证以评估微卫 星标记倍性检测的准确性 另外本研究探讨了准确鉴定倍性所需的微卫星标记数量与微卫 星 着丝粒重组率 之间的关系以期为其他物种采用分子标记进行倍性检测提供理论依 据 结果显示细胞松弛素诱导产生的 个长牡蛎子代经 个微卫星位点鉴定得到 个 三倍体与流式细胞仪检测结果一致准确率达到 个微卫星位点的 的乘积为 随机挑选 个位点也可鉴定出所有三倍体 的乘积为 研究表 明本研究中开发的微卫星标记可以简单高效地鉴定长牡蛎三倍体微卫星位点的 的 乘积小于 倍性检测的准确率可达 采用微卫星标记进行倍性检测对于加速长牡 蛎三倍体育种进程具有十分重要的意义 关键词 长牡蛎 微卫星 倍性检测 微卫星 着丝粒重组率 中图分类号 文献标志码 长牡蛎 又称太平洋牡蛎 此开发一种简便高效的多倍体筛选技术对于加速 属软体动物门 双壳纲 牡 长牡蛎三倍体育种进程具有十分重要的意义 蛎目 巨蛎属 是一种广 微卫星具有共显性遗传多态 温广盐性的内湾贝类 因其具有生长快个体 性高重复性好实验操作简单等优点是遗传学研 大产量高生产周期短等优点而成为一种重要的 究的重要分子标记 近年来随着第二代测序技术 经济贝类目前已成为养殖范围最广养殖产量最 的推广长牡蛎中已开发得到 多个微卫星标 大的海产贝类 与二倍体相比三倍体长牡蛎具 记 其中 个位点定位于着丝粒图谱中 有育性差生长快等特点现已在中日韩及欧美国 长牡蛎常通过抑制第二极体的排放即阻止第二次 家实现规模化养殖 减数分裂过程中姐妹染色单体的分离诱导产生三 无论是人工诱导多倍体的研究实验还是多 倍体 理论上此方法产生的三倍体只含有母本一 倍体规模化养殖生产都需要一种简单有效的多 个等位基因然而如果微卫星标记与着丝粒之间 倍体鉴定方法从而对诱导结果的有效性进行准 距离较远四分体时期非姐妹染色单体之间可能发 确评估 目前倍性检测的方法很多如流式细胞 生交叉互换而导致基因重组倘若微卫星标记在母 本中为杂合位点三倍体子代可能遗传得到母本的 仪检测法 染色体分析法 荧光显微分析法 两个等位基因因此通过子代是否含有母本的两个 同工