酪氨酸羟化酶重组腺病毒在293细胞中的表达及体外活性测定.PDFVIP

2010;30(4) 南方医科大学学报(JSouthMedUniv) 窑681 窑 酪氨酸羟化酶重组腺病毒在293 细胞中的表达及体外活性测定 王文举袁孙茂盛袁严 敏袁谢天宏袁张光明袁李鸿钧渊中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所袁云南 昆明 650118冤 摘要院目的构建一种能够携带酪氨酸羟化酶(TH)进入帕金森氏病动物模型体内的重组腺病毒袁该病毒能够使TH基因 转录并且能够翻译成具有活性的功能蛋白遥 方法 将TH基因插入穿梭质粒袁重组穿梭质粒与腺病毒基因组在BJ-5183 中进行同源重组袁将重组成功的腺病毒基因组转染293 细胞袁使其在293 细胞中包装出重组腺病毒袁RT-PCR 和免疫荧 光检测目的基因的转录和表达遥利用毛细管电泳法检测L-DOPA 的生成遥 结果 成功构建能够表达TH基因的重组腺 病毒袁RT-PCR 能够扩增目的插入片段袁毛细管电泳能够检测到L-DOPA 的生成遥 结论 该重组腺病毒能够在体外很好 地表达具有活性的酪氨酸羟化酶袁为利用该基因对帕金森氏病动物模型进行基因治疗打下基础遥 关键词院酪氨酸羟化酶曰重组腺病毒曰帕金森病曰毛细管电泳 中图分类