第六节-：酶-生物竞赛.pptVIP

第五节 酶促反应动力学 定义： 酶促反应动力学是研究酶促反应速度以及各种条件下对酶反应速度的影响。 1 在低底物浓度时, 反应速度与底物浓度成正比，为一级反应。 2 底物浓度增大与速度的增加不成正比,为混合级反应. 3 当底物浓度达到一定值，几乎所有的酶都与底物结合后，反应速度达到最大值（Vmax），此时再增加底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。 一 底物浓度对酶促反应速度的影响 (一)V-S曲线 底物浓度 1913年，德国化学家Michaelis和Menten根据中间产物学说对酶促反映的动力学进行研究，推导出了表示整个反应中底物浓度和反应速度关系的著名公式，称为米氏方程。 Km — 米氏常数 Vmax — 最大反应速度 （二）米氏方程 （二）Km和Vmax的意义： 1. 当?= Vmax／2时，Km=[S]。因此，Km等于酶促反应速度达最大值一半时的底物浓度。 ── Vmax 2 Vmax[S] Km + [S] = 2. Km可以反映酶与底物亲和力的大小。Km越小，酶与底物的亲和力越大，酶促反应越快。Km越大，则亲和力越小。 E + S k+1 k-1 k+2 ES E + P k-1 + k+2 k+1 Km = =Ks Km物理含义：ES复合物消失速度常数与形成速度常数之比。 3. 可用于判断反应级数： 当[S]0.01Km时，反应为一级反应； 当[S]100Km时，ν=Vmax，反应为零级反应； 当0.01Km[S]100Km时，为混合级反应。 酶的催化作用可使反应速度提高106 -1012倍。 例如：过氧化氢分解 2H2O2 2H2O + O2 用Fe3+ 催化，效率为6*10-4 mol/mol.S，而用过氧化氢酶催化，效率为6*106 mol/mol.S。 用?-淀粉酶催化淀粉水解，1克结晶酶在65?C条件下可催化2吨淀粉水解。 1．高效性 酶的专一性 Specificity又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性。根据专一性的不同又可分为： （1) 绝对专一性 （2）相对专一性 （3）立体异构专一性 2．专一性 （1） 绝对专一性 有些酶对底物的要求非常严格，只作用于一个特定的底物。这种专一性称为绝对专一性（Absolute specificity)。如，过氧化氢酶，只催化过氧化氢的分解。 （2）相对专一性 有些酶的作用对象不是一种底物，而是一类化合物或一类化学键。这种专一性称为相对专一性(Relative Specificity)。如，胰蛋白酶，催化碱性氨基酸的羧基所形成的肽键。 （3）立体异构专一性 酶的一个重要特性是能专一性地与手性底物结合并催化这类底物发生反应。 例如，淀粉酶只能选择性地水解D－葡萄糖形成的1，4－糖苷键 光学专一性 几何专一性 有些酶只能选择性催化某种几何异构体底物的反应，而对另一种构型则无催化作用。 如延胡索酸水合酶只能催化延胡索酸水合生成苹果酸，对马来酸则不起作用。 酶的立体异构特异性 酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行，反应温度范围为20-40?C。 高温或其它苛刻的物理或化学条件将引起酶的失活 3．反应条件温和 4.酶的催化活性可调节控制 如抑制剂调节、共价修饰调节、反馈调节、酶原激活及激素控制等。某些酶催化活力与辅酶、辅基及金属离子有关。 第三节 酶结构与功能的关系 酶的化学本质是蛋白质，同样具有一、二、三级结构，有些酶还具有四级结构。作为生物催化剂，酶的结构又有一些特点。 一 活性部位：酶分子中直接与底物结合，并 催化底物发生反应的部位。 酶活性中心 结合部位：酶与底物结合的部位， 决定酶的专一性 催化部位：催化底物发生反应的部位， 决定酶的催化效率、反应性质。 酶活性中心包括两个部位 主要包括： 亲核性基团：丝氨酸的羟基，半胱氨酸的巯基和组氨酸的咪唑基。 必需基团：在酶分子中和酶的催化活性直接有关的基团，活性中心内外都有。 酸碱性基团：天门冬氨酸和谷氨酸的羧基，赖氨酸的氨基，酪氨酸的酚羟基，组氨酸的咪唑基和半胱氨酸的巯基等。 必需基团： 已糖激酶的活性中心 结合基团 活性中心内必需基团 （活性中心） 催化基团 活性中心外必需基团 如形成变构中心