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双抗体夹心ELISA法测定食物中花生过敏原蛋白成分-深圳大学
年 月
2009 6
第 卷第 期 食食品研究与开发食品研究与开发食品研究与开发品研究与开发 检测分析
110 30 6
双抗体夹心ELISA 法测定食物
中花生过敏原蛋白成分
1 1 2 1 1，
吉坤美 ，陈家杰 ，汤慕瑾 ，郑丽 ，刘志刚 *
（1.深圳大学过敏反应与免疫学研究所，广东深圳 518060；2.深圳出入境检验检疫局，广东深圳 518067）
摘 要：通过建立双抗体夹心ELISA 法测定食物中花生过敏原蛋白成分，为进出口食品花生过敏原成分检测和由花
生导致的食物过敏性疾病的预防提供技术基础。提取花生总蛋白，免疫小鼠制备抗花生总蛋白的多克隆抗体，用该
抗体包被酶标板，并用生物素标记该多抗，从而建立双多抗体夹心ELISA 法；自制花生总蛋白标准品并检测该方法
的灵敏度，同时检测15 种食品中是否含有花生蛋白成分。成功地研制出双抗体夹心ELISA 法检测食品中花生过敏
原蛋白成分，具有特异性，其最低检出限为8 ng/mL，标准曲线在8 ng/mL～125 ng/mL 范围内线性良好；13 种食品检测
结果与食物过敏原标签标注内容相符，而2 种标示不详的食品检测结果均呈现阳性。
关键词：ELISA；多克隆抗体；花生过敏原；食物过敏
DETECTION OF PEANUT ALLERGEN PROTEIN TRACE IN FOOD PRODUCTS BY SANDWICH-ANTIBODY
ENZYME LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY
1 1 2 1 1,*
JI Kun-mei , CHEN Jia-jie , TANG Mu-jin , ZHENG Li , LIU Zhi-gang
(1.Allergy and Immunology Institute, Shenzhen University, Shenzhen 518060, Guangdong, China;
，
2.Shenzhen Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Shenzhen 518067 Guangdong, China)
Abstract: To develop a new method with sandwich-antibody enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) to
detect peanut allergen protein trace in food products,which will provide a technical tool to prevent peanut
allergy. The total peanut protein was extracted and further analyzed by SDS . The Balb/c mice were
immuned with the extracts of peanut proteins and the highly -titrated polyclonal IgG antibodies against them
were isolated and coupled w
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