高效液相色谱法测定野蔷薇果实中齐墩果酸的含量.pptVIP

毕业论文 题 目：高效液相色谱法测定野蔷薇果实中齐墩果酸的含量 专 业：化 学 摘要： 建立高效液相色谱法测定野蔷薇中齐墩果酸的含量。方法：采用色谱柱分离；Varian ProStar240高效液相色谱仪，C18色谱柱分离,流动相A：水，B：甲醇，AB（15：85）检测波长：210 nm，流速：1.0 ml / min，柱温：20℃。齐墩果酸在浓度0.007—0.07mg / ml范围内呈良好的线性关系，线性回归方程为： y=877.23x+5.0342 ,(R2= 0.9982 )。 结论：该方法简便，快速，定量正确，稳定。 关键词： 野蔷薇 齐墩果酸 高效液相色谱法 前言: 野蔷薇：蔷薇科蔷薇属(Rosa)有200多种，广布于北半球温带和亚热带地区，中国有82种[1]，约占世界种类40%。各地均有分布，在新疆野蔷薇属植类27种，变种12种，变形34种。被认为是极有开发利用价值的第三代水果[2]，在新疆各地分布广泛，民间用其治疗白内障﹑消散粒状口疮﹑固精﹑止泻﹑通经﹑止疼，其果毛和果肉用于治疗咽喉炎；据文献报道野蔷薇果中含有丰富的维生素A、B2、C、P、E、K，芦丁,齐墩果酸等。传统测定齐墩果酸的方法主要有荧光分光光度法[1]、化学滴定法[1]，比色法[2]、双波长薄层扫描法[2]等，由于上述法的显色误差较大，定量很不准确，操作繁琐、而且还费时间等缺点[2]，近年来多采用高效液相色谱法测定，具有高效、快速、稳定、可靠等特点. 国内目前尚鲜有报道有关测定野蔷薇中齐墩果酸的含量，本实验采用高效液相色谱法对野蔷薇中的齐墩果酸的含量进行测定，取得了较好的结果。 高效液相色谱法 ： 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。 高效液相色谱法是一种分离分析方法，适用于挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物等的定性、定量分析。 近年来多采用高效液相色谱法具有应用最广泛，分析速度快，准确度高，重复性好，可靠，测定方法简便，操作简单，所需的进样量低，灵敏度高等特点。 齐墩果酸 ：【英文名称】Oleanic acid【化 学 名】3β-hydroxy-olea-12- en-28-oic acid结构式：分子式：C30H48O3分 子 量：456.71 齐墩果酸: 是白色针晶（乙醇）；无臭，无味，可溶于甲醇、乙醇、苯、乙醚、丙酮和氯仿，几乎不溶于水，对酸碱均不稳定。熔点：308℃～310℃，成分分类:五环三萜类. 齐墩果酸主要具有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤等作用， 还具有降血糖、降血脂、镇静的作用，是开发治疗肝病和降血糖等药物有效成分。? ??? １.仪器与药品: 仪器: Varian ProStar240高效液相色谱仪，二极管陈列检测器；超声波仪器,旋转蒸发仪器.回流装置. 样品:蔷薇果采自新疆阿勒泰县，由新疆大学生物研究所努尔拜老师鉴定为疏 花蔷薇和多刺蔷薇的干燥成熟果皮。 药品:齐墩果酸标准品(中国药品生物制品检定所，批号（110709―200304),甲醇，超纯水，乙醇、氯仿为分析纯。 ２.实验方法: ２.１色谱条件:采用Varian ProStar240高效液相色谱仪,c18色谱柱分离；流动相A：水，B：甲醇，AB（15：85）检测波长：210 nm，流速：1.0 ml/min，柱温为室温，进样量为10ul。 　２.２ 对照品溶液的配制 精密称取干燥至恒重的齐墩果酸对照品0.7mg/ml，于10ml溶量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，得浓度为0.07mg/ml标准溶液。再精密吸取标准溶液4ml ,于5ml溶量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，浓度为0.056mg/ml。用逐步稀释法，分别配制浓度为0.028，0.014，0.007mg/ml，最大浓度为0.1mg/ml的齐墩果酸对照品溶液，封闭好，按上述色谱条件准备进样。 ２.３样品的提取: 将野蔷薇果实除去种子及种毛，，磨碎过100目筛，，称取5.000 g，50%乙醇50 ml、功率1 200 W超声30 min后过滤，再加50 ml超声10 min，合并提取液，70℃减压浓缩至干，加1.5 mol/LH2SO4溶液50 ml沸水回流水解4 h后，加氯仿15 ml再回流15 min，冷却后分液，用50 ml氯仿萃取，合并氯仿液，减压回收氯