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妇产科学专业优秀论文 不同HPV DNA检测方法在HPV感染检测及宫颈病变诊断中的比较研究 关键词：人乳头状瘤病毒 杂交捕获Ⅱ代 多聚酶链式反应 实时荧光定量PCR 宫颈病变 PCR诊断 摘要：目的 评价原位杂交法(in situ hybridization，ISH)、导流杂交基因芯片技术(HybriMax)、实时荧光定量PCR法(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)和流式荧光杂交法在宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染检测及宫颈病变诊断中的应用价值。 方法 从2004年1月-2007年4月，在中同友好医院妇科宫颈病变诊治中心行宫颈液基细胞检查者共21870例中，选取不同时间段内的特定的机会性筛查人群，分别行ISH和三种PCR基础上的检测方法，即HybriMax、FQ-PCR和流式荧光杂交法检测宫颈标本HPV DNA。其中，耳义189例组织学诊断为CIN和宫颈癌的组织石蜡切片标本(ISH组)，用ISH行HPV16/18亚型检测；选取310例细胞学样本(HybriMax组)，采用HybriMax进行21种HPV亚型的分型检测；选取600例细胞学样本(FQ-PCR组)，用FQ-PCR进行8种HPV亚型分型及定量检测；选取1012例细胞学样本(流式荧光杂交法组)，用流式荧光杂交法进行15种HPV亚型的分型检测。所有研究对象均同时用杂交捕获Ⅱ代(HC-Ⅱ)进行宫颈细胞13种高危型HPV的检测作为对照。比较各种方法与HC-Ⅱ之间的HPV DNA检测阳性率、符合率和Kappa指数(KI)，以及对≥CIN Ⅱ宫颈病变的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)。 结果 1．ISH组，ISH的HPV DNA总阳性率(55.08％)低于HC-Ⅱ(85.71％)， Pamp;lt;0.01，有显著性差异；对≥CIN Ⅱ宫颈病变的敏感性，ISH低于HC-Ⅱ(56.7％对90.1％)，Pamp;lt;0.01，而特异性高于HC-Ⅱ(45.8％对27.1％)，Pamp;lt;0.05，有统计学差异。 2．HybriMax组，HybriMax与HC-Ⅱ对检测相同13种高危型HPV感染的阳性率分别为75.5％和73.5％，无统计学差异(Pamp;gt;0.05)，总符合率92.3％，KI=0.796，一致性极好；对≥CIN Ⅱ宫颈病变的敏感性、特异性、PPV和NPV，HybriMax分别为92.8％、28.6％、40.2％、89.7％，HC-Ⅱ分别为91.7％、34.7％、39.0％、90.2％，均无统计学差异，Pamp;gt;0.05。 3．FQ-PCR组，FQ-PCR与HC-Ⅱ的总阳性率分别为56.8％和64.5％，无统计学差异(Pamp;gt;0.05)，总符合率为86.7％，KI=0.722，结果一致性良好；对≥CINⅡ病变的诊断敏感性、特异性、PPV、NPV，FQ-PCR分别为83.9％、53.7％、41.4％、89.6％，HC-Ⅱ分别为88.7％、52.1％、38.5％、91.1％，均无统计学差异，Pamp;gt;0.05。 4．流式荧光杂交法组，流式荧光杂交法与HC-Ⅱ对检测13种高危型HPV感染的阳性率分别为49.0％和48.5％，无统计学差异(Pamp;gt;0.05)，总符合率为86.1％，KI=0.721，结果一致性良好；对≥CIN Ⅱ病变的诊断敏感性，流式荧光杂交法(88.8％)低于HC-Ⅱ(93.1％)，但无统计学差异，Pamp;gt;0.05；流式荧光杂交法的特异性、NPV(分别为66.6％和91.7％)均低于HC-Ⅱ(分别为74.2％和96.5％)，P值均amp;lt;0.01，有统计学差异；流式荧光杂交法PPV(54.2％)低于HC-Ⅱ(60.1％)，Pamp;lt;0.05，有统计学差异。 结论 1．在HPV感染检测及宫颈病变诊断中，HC-Ⅱ临床敏感性高，具有良好的检测性能。 2．原位杂交法敏感性较低，方法费时，不适合大觇模临床应用。 3．三种PCR基础上的检测方法，即导流杂交基因芯片技术、实时荧光定量PCR法和流式荧光杂交法检测HPV DNA结果与HC-Ⅱ一致性好，具有可比性。 4．PCR方法分析敏感性高，临床敏感性低于或近似于HC-Ⅱ；对诊断≥CIN Ⅱ宫颈病变的敏感性、特异性、PPV、NPV，导流杂交基因芯片技术和实时荧光定量PCR法与HC-Ⅱ相似，而流式荧光杂交法逊于HC-Ⅱ。 5．PCR方法具有分型检测的优点，实时荧光定量PCR法能进行分型的型别较少，但有定量检测的优点。 正文内容 目的 评价原位杂交法(in situ hybridization，ISH)、导流杂交基因芯片技