基因工程技术在改进微生物菌种方面应用 .pptVIP

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2018-04-30 发布于福建
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基因工程技术在改进微生物菌种方面应用

基因工程技术在改进微生物菌种方面的应用主要应用: 1. 提高次级代谢产物的产量 2. 改进代谢产物的组分 3. 改进菌种的生理性能 4. 产生新的代谢产物 * (一) 提高次级代谢产物的产量基因工程技术提高抗生素产量的主要手段 1. 增加限速酶的基因拷贝数 2. 增加正调节基因,去除负调节基因 3. 增加抗性基因的拷贝数 * 1. 增加限速酶的基因拷贝数原理： Ea Eb Ec Ed A B C D E ( 代谢产物）限速酶 Rate-limiting Bottleneck Ea Eb Ec 例1: 起始原料 ACV三肽异青霉素N 青霉素 ?-aminoadipic acid L-cysteine Ea: ACV合成酶 Ec:异青霉素N酰基水解酶 L-valine Eb:异青霉素N合成酶青霉素酰基转移酶 * 异青霉素N合成酶对P.chrysogenum青霉素产量的影响菌株原始菌株低产菌株高产菌株 Wis 54-1255 AS-P-78 IPNS 的基 1 ---- 9-14 因拷贝数 mRNA量 1 ---- 32-64 青霉素产量 100% 导入带IPNS 140% 的基因片段 * 增加IPNS基因提高青霉素产量转化青霉素产生菌 Wis54-1255 转化菌株青霉素V产量提高40% * 例2. 头孢菌素C生物合成的限速酶在头孢菌素C 的工业发酵生产中，人们发现发酵结束后在得到的发酵液中，除了主要产物是头孢菌素C外，在发酵液中还积累另一种产物-青霉素N。问题：积累中间产物-青霉素N 原因：下一步反应为限速酶反应解决：导入额外的扩环酶/羟化酶基因结果：使头孢菌素C的产量提高 25-50%，积累的青霉素N消失。 * 增加限速酶