方氏头针对血管性痴呆大鼠海马CA1区星形胶质细胞凋亡的影响汇总.pdf

中文摘要 【目的】观察方氏头针对血管性痴呆大鼠学习记忆能力以及海马CA1 区星形胶质细 胞凋亡蛋白Bcl-2 表达的影响，从星形胶质细胞凋亡的角度探讨方氏头针治疗血管性 痴呆的作用机制，为针刺治疗血管性痴呆提供理论及实验依据。 【方法】将60 只健康雄性SD 大鼠随机分为6 组：模型组（VaD 组）、模型加头针组 （VaD+F’SA 组）、假手术组（Mock 组）、假手术加头针组 （Mock+F’SA 组）、正常 组（Normal 组）、正常加头针组（Normal+ F ’SA 组），每组10 只，采用改良Pulsinelli 四血管阻断（4-vo ）法制备血管性痴呆大鼠模型，VaD+F’SA 组、Mock+F’SA 组、 Normal+ F’SA 组针刺头部 “倒脏上焦（双侧）、记忆（双侧）、思维”穴，每日1 次， 10 日后，应用Morris 水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力的变化，评价方氏头针对血 管性痴呆的治疗效应；采用免疫荧光双重标记技术以及免疫印迹法（Western-Blot ） 检测各组大鼠海马CA1 区星形胶质细胞凋亡相关蛋白Bcl-2 表达的变化。 【结果】1.Morris 水迷宫行为学测试结果 与正常组及假手术组比较，模型组大鼠在定位航行试验中的平均逃避潜伏期 （escape latency ）延长，空间探索试验中第一次跨越原象限平台的时间延长，2min 内跨越平台次数减少(P0.01) ；与模型组比较，模型加头针组大鼠平均逃避潜伏期明 显缩短，第一次跨越原象限平台时间缩短，2min 内跨越次数增多，二者之间比较有 显著性差异(P0.01) ；正常加头针组、假手术加头针组大鼠的平均逃避潜伏期及空间 探索试验成绩较正常组及假手术组均有所好转，组间比较无统计学意义（P0.05 ）； 正常组与假手术组比较，二者之间无明显变化（P0.05 ）。 2.激光共聚焦显微镜下GFAP 和Bcl-2 共表达结果 模型组大鼠海马CA1 区GFAP 和Bcl-2 共表达的免疫荧光细胞较正常组及假手术 组均明显下降（P0.01 ），而模型加头针组大鼠海马CA1 区GFAP 和Bcl-2 共表达的 免疫荧光细胞较模型组显著上调，二者比较，具有显著性差异（P0.01 ），正常加头 针组、假手术加头针组大鼠CA1 区GFAP 和Bcl-2 共表达的免疫荧光细胞较正常组及 假手术组均有所上调，组间比较无统计学意义（P0.05 ）；正常组与假手术组相比则 无明显变化（均P0.05 ）。 3. 海马CA1 区Bcl-2 蛋白水平的变化 血管性痴呆发生后，海马CA1 区星形胶质细胞中凋亡因子Bcl-2 蛋白表达明显下 降（P0.01 ），而方氏头皮针治疗可明显上调Bcl-2 蛋白的表达，与模型组相比有显著 性差异（P0.01 ），正常加头针组、假手术加头针组大鼠CA1 区星形胶质细胞中Bcl-2 表达较正常组及假手术组均有所上调，组间比较无统计学意义（P0.05 ）；正常组与 假手术组相比则无明显变化（均P0.05 ）。 【结论】1.方氏头针能有效改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力； 2.方氏头针改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力的治疗效应可能与上调大鼠 海马CA1 区星形胶质细胞凋亡相关蛋白Bcl-2 的表达，抑制中枢神经系统内星形胶质 细胞凋亡有关。 【关键词】方氏头针；血管性痴呆；学习记忆；星形胶质细胞；细胞凋亡；Bcl-2 The effect of Fang’s scalp acupuncture on astrocyte apoptosis in hippocampal CA1 region of rats with vascular dementia Abstract 【Objectives 】To investigate the effect of Fang’s scalp acupuncture on the ability of learning and memory of rats with vascular dementia and expression of Bcl-2 of astrocytes in the CA1 region of hippocamp