环介导等温扩增技术检测单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型及人乳头瘤病毒6型和11型的实验研究汇总.pdfVIP

主要缩略语英文索引 缩略语 全 称 中 文 名 称 Bp base pair 碱基对 BLAST basic local alignment tool 序列相似性分析工具 CPE cytopathogenic effects 细胞病变效应 dNTP deoxyribonμcleoside triphosp 脱氧核糖核苷三磷酸 DNA deoxyribonμcleic acid 脱氧核糖核酸 EB ethidiμm bromide 溴化乙啶 GH gential herpes 生殖器疱疹 GW gential warts 生殖器疣 HSV herpes simple virus 单纯疱疹病毒 HPV human papillomavirus 人乳头瘤病毒 HIV human immunodeficiency virus 人类免疫缺陷病毒 LAMP loop-mediated isothermal amplification 环介导等温扩增. M marker 分子量标准品 OD optical density 光密度 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链反应 PBS phosophate buffered saline 磷酸盐缓冲液 RNA ribonucleic acid 核糖核酸 RPMI-1640 roswell park memorial institute 1640 RPMI-1640 培养基 medium rpm revolution per min 每分钟转速 1 应用环介导等温扩增技术检测单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型及 人乳头瘤病毒6 型和11 型 的实验研究 硕士研究生：周支香 导 师：杨秋林 副教授 中 文 摘 要 目的: 建立单纯疱疹病毒 （Herpes Simple Virus） Ⅰ型和Ⅱ型、人乳头瘤病 毒 （Human Papillomavirus）6 型和 11 型的 LAMP 检测方法。 方法: 分别设计扩增各型病毒特异基因的LAMP 引物，提取病毒 DNA，配置 LAMP 反应体系，60～65 ℃保温约 60 min，完成对靶病原体基因的扩增，肉眼及电泳 判定扩增结果。LAMP 扩增产物经酶切进一步鉴定；设立对照组，评价 LAMP 方法 的特异性；10 倍系列稀释模板，检测 LAMP 技术的敏感性。 结果: 实验组经 LAMP 后，肉眼观察到 LAMP 扩增产物的出现，电泳后呈 LAMP 特征性梯状条带，对照组均无扩增产物；HSV 及 HPV LAMP 扩增产物经相应限制 性内切酶酶切鉴定正确，特异性实验结果显示与对照