生物化学试验教学大纲农学.doc

《生物化学实验》课程教学大纲 【课程编号【英文名称】Experiments of Biochemistry 【课程学时】24 【适用专业】农学 一、本实验课程的教学目的和要求 《生物化学实验》既是生物化学理论教学的辅助教程，也是一门重要的专业基础实验技术课程分子生物学学生1.在实验过程中生物化学的理论知识进一步验证、巩固、扩充和提高2.学会正确使用有关生化仪器3.培养学生在进行生物学实验时的实验过程、结果分析、实验设计和动手实验的能力，培养和提高学生的实验操作技能4.掌握包括蛋白质、核酸、酶、维生素、脂类和代谢各方面实验方法和技能，掌握离心、滴定、比色、层析、电泳等各种生物化学实验技术5.培养学生学习兴趣、重视实践、探索进取、吃苦耐劳、团结合作的精神。。 6.培养科研能力和科学素质，使学生具有严格的科学学风和发现、分析、解决问题的初步能力 本实验课程上承《无机化学实验》、《分析化学实验》和《有机化学实验》，下续《遗传学实验》、《植物生理学实验》、《微生物实验》、《分子生物学 三、实验课程理论教学内容安排（共安排4学时） 第一部分 生物学实验与化学实验的主要区别（0.5学时） 【目的要求 第一节 空白（对照）实验的含义 第二节 空白（对照）实验的设定 【教学重点】空白实验的意义。 【教学难点】设计空白实验。 第二部分 比色测定的方法与原理（2.5学时） 【目的要求 第一节 关键溶液的分析与配制； 第二节 比色过程的分析； 第三节 结果处理方法的选择； 【教学重点】实验结果的处理。 【教学难点】实验结果的数据分析。 第三部分 电泳的方法与原理（1.0学时） 【目的】 通过电泳实验的理论讲授，熟悉电泳的原理、电泳的结果分析和过程中的关键步骤。 【要求】 1、了解电泳的原理。 2、理解实验结果的分析。 3、掌握电泳过程中的关键步骤。 【教学内容】通过醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂凝胶电泳分离血清蛋白质，掌握电泳的方法与原理。 第一节 电泳材料的前期处理； 第二节 电泳过程中的关键步骤； 第三节 电泳结果的分析； 【教学重点】电泳的操作过程。 【教学难点】电泳过程中的关键步骤。 四、实验内容安排 1、实验项目的类型及性质 序号 实验名称 学时 类型 性质 验证 综合 设计 演示 必做 自选 1 糖原的提取与鉴定 3 √ √ 2 植物VC的提取与定量测定 3 √ √ 3 酶活性的测定 4 √ √ 4 比色法测植物总糖 6 √ √ 5 胆固醇含量的测定 3 √ √ 6 植物总蛋白的测定 6 √ √ 7 植物总脂的测定 6 √ √ 8 电泳分离蛋白质 6 √ √ 9 亲和层析分离乳酸脱氢酶 8 √ √ 实验学时数合计 45 42 0 3 0 21 24 实验项目数合计 9 8 0 1 0 4 5 2、实验项目说明 实验一、糖原的提取与鉴定 【目的】通过对糖原的提取，了解空白实验的意义，掌握糖原的性质。 【要求】验证肝糖原的提取方法和重要的鉴定特点。了解糖原的提取方法和分离措施。 【内容】肝糖原是糖在动物体内的重要贮存形式，在代谢过程中是体内糖的重要来源之一。其合成与分解对血糖的调节起重要作用。糖原是高分子化合物，分子量约400万，微溶解于水，无还原性，与碘作用生产红色物质。糖原的水解产物为葡萄糖，在碱性条件下可将Cu2+还原为红色的CuO。 【方法】乙醇提取法。 实验二、植物VC的提取与定量测定 【目的】通过对维生素C的提取和定量，掌握维生素C的提取方法，熟悉定量分析时空白（对照）实验的意义以及对照实验的设计方法。 【要求】了解维生素C的提取方法和定量测定方法，同时熟悉定量分析时空白（对照）实验的意义以及对照实验的设计方法。学会设计空白的操作和步骤。 【内容】维生素C广泛存在于植物中，其存在形式有还原型维生素C（抗坏血酸）和氧化型维生素C（脱氢抗坏血酸），新鲜的样品中以还原型维生素C含量最高。维生素C很不稳定，对碱、热、光、氧、金属离子等敏感，很容易遭到破坏。在中性和微酸性条件下稳定，因此实验中常用草酸、三氯乙酸、醋酸等来提取样品中的维生素C。 【方法】组织粉碎提取、研钵提取，碘指示，2,6-二氯酚靛酚 实验三、酶活性的测定 【目的】通过对酶活性的测定，掌握酶活性的测定原理，理解酶活力和比活性含义的意义 【要求】了解酶活性的测定原理，掌握脂肪酶、酯酶活性的测定方法。 【内容】酶与底物反应后，对底物或产物的测定来定量酶的活性。如脂肪酶水解脂肪，产生的脂肪酸可用标准的碱溶液进行滴定而测定脂肪酶的活力。酯酶可将乙酰-2,6-二氯酚靛酚水解为2,6-二氯酚靛酚，测定2,6-二氯酚靛酚的含量即可测出酯酶的活力。