试验八显微摄影Microphotography.doc

实验八　　显微摄影（Microphotography） 物理学与信息学教研室 庄 晓 【】【】Ⅳ 计算机；打印机各一台（选做内容）。 【】 如果调节物镜成像的位置(可使标本适当远离物镜或升高目镜，即增大目镜与物镜间的距离，使中间成像介于目镜的一倍焦距与两倍焦距之间)，使物镜所成的像位于目镜前焦点的外侧，此像再经过目镜放大，即可在目镜的另一侧得到一个经二次放大的正立实像，如图8-2所示。当光源足够强时，此像可使底片或相纸感光，或者使数码相机、摄像机的CCD光电元件感光成像，这就是显微摄影的原理。 将一个特制的摄取影仪装在普通显微镜上方，即可进行显微摄影。其整个实验装置如图8-3所示。由三部分组成 (1)XTL3400型连续变倍体视显微镜；(2)生物接筒；(3)ZA-—1显微摄影仪。生物接筒是显微镜和摄影仪的连接装置，内装有目镜(安装接筒时，己将显微镜原目镜拆除)。ZA--1型显微摄影仪为分光棱镜式摄影仪，内有棱镜，经目镜射出的光线，一部分经棱镜透射至摄影仪顶部成像，使感光纸感光，一部分经棱镜反射至观察镜筒的光屏上战像。摄影仪通过精密的光设计，当操作者调节视度调节圈，首先在观察镜筒中看到清晰的“╬”标记，然后调节显微镜的调焦手轮，使眼睛从摄影仪的目镜中能观察到标本清晰的像，则在顶部暗盒夹处也必成一清晰的像。因此操作者可通过观察镜筒进行观察和取景，调节满意后，就能直接曝光、摄影。摄影仪中还装有快门装置，快门的开、闭由快门线控制。 图8-3显微摄影装置 感光材料：一般为溴化银乳剂，将其涂在胶片上就成为胶卷(底片)，如果将其涂在纸上就成为感光纸，曝光时在光的作用下部分溴化银粒子被还原成金属银而形成潜像，这就是拍照过程。再经过显影液的作用，潜像就变成黑色金属银留在乳剂中，金属银还原的多少即黑度的深浅与曝光时间的长短和光的强弱及波长有关，再经过定影液作用，将未还原的溴化银熔解在定影液中，底片该处就呈透明，这时底片呈现与实物相反的影像，叫做负片。用印相纸复印，就能得到平常所见的照片，(复印是将印相纸的药膜面和底片的药膜面紧贴后曝光，再经显影、定影处理后即得照片)。 目前流行的实用显微摄影的方法主要有三种（注：不包括本实验所用的相纸感光）： 第一种方法是利用传统的菲林相机，让被摄物体成像于黑白或彩色胶片上，制成负片，再把它冲印放大成照片（正片），以便观察研究和永久保存。或者让被拍摄物体成像于反转片上，直接制成正片，用于幻灯投影。要求不高时也可直接成像于相纸上，成为一负片，并不影响相片的分辨率。本物理实验室为本、专科学生提供这一显微摄影广方法。 第二种方法是利用数码相机，通过专用接筒或外接专用镜头，把被摄物体成像于数码相机的内存中。成为一个压缩的JPEG文件，传输到计算机中，再利用图像显示软件把图像显示于监视器上，或者直接通过打印机输出相片来。也可把图像存贮于媒介上，如软盘、闪存盘、光盘等，再通过数码冲印商店，冲印出数码相片。 由于目前市场上大多数数码相机都是不可变换镜头的相机（除了个别昂贵的专用数码相机，如Nikon的Ｄ1型相机外），所以显微镜不设连接数码相机的卡口，而通过加设一镜头接筒的方法，再连接某些特殊镜头结构的数码相机，如本实验采用的Nikon Coolpix 4500型数码相机。 第三种方法，则是在显微镜上加接专用连接镜头，接上CCD摄录镜头，再把动态的图像传送到计算机，通过软件在显示器上表现出动态图像来，可把Video图像存储成某种格式的文件，如avi、mpeg或mov等。也可把瞬间的影像保存到计算机中，成为储存器上的一静态图像的文件，如bmp、tif或jpg等，与数码相机所获得的图像相似。这种方法的优点是能够获得动态图像，在视觉效果上更生动、更胜一筹。不过其静态图像的分辩率一般只能用于电视机或显示器上的显示，并不适合于打印输出和印刷等领域。 本实验室目前能提供第一种（加上相纸成像方法）和第二种显微摄影方法。 【】╬”清晰可分，再观察该目镜中标本的成像，如果图像不清，可转动XTL3400显微镜的调焦手轮使其清晰，这时标本就在相纸所在的平面上形成一清晰的像。 以上的工作完成后，即可开始摄影。首次操作曝光的同学应预先练习几次，然后才进行真正的拍摄操作。步骤如下：确保秒表已上弦并已回零；左手按下秒表启动按钮，与此同时，确保快门线成一直线并用右手按下其按钮且一直按住不放，听到“嘀嗒”一声响，这时快门开启，开始曝光，秒表指针走到１０秒处时，松开右手，又听到“嘀嗒”一声响，快门合闭，相纸被曝光１０秒钟。记下这一时间。 小心地把暗盒的挡板推到底，合上暗盒，再把它卸下来，拿到暗房进行冲洗。 暗房中之操作步骤： 暗房中