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第一篇 DNA 电泳
植物病毒研究室 基因工程操作原理 I. DNA 电泳 Agarose的结构 电泳的基本原理 分子筛 DNA分子带负电，向正电方向游泳 电泳快慢的决定因素 DNA分子量的大小 DNA分子的构型 质粒DNA分子具有三种构型：共价闭合环开DNA（cccDNA,SC构型）、开环DNA（OC构型）和线性分子（L构型）。 质粒DNA三种构型在琼脂糖上的电泳速度 三者电泳速度由快到慢排序为：共价闭环DNA、线性DNA、开环DNA。 但是，随电泳条件的不同有时开环质粒DNA和线状DNA的位置会发生互换。 在做质粒的上有没有这个酶切位点鉴定的时候，用原质粒和经过单酶切的质粒在同一块胶上进行电泳，看单酶切后的质粒是不是比原质粒跑得快从而鉴定出质粒有没有被切开。 DNA在胶上的检测 Ethidium bromide SYBR Gold 检测波长300-nm UV light. 割胶回收 * Melting at 85 °C and solidifying from 32-40 °C? D-galactose and 3,6-anhydro-L-galactopyranose. Recipe 6x Gel-loading Buffer I 0.25% (w/v) bromophenol blue 0.25% (w/v) xylene cyanol FF 40% (w/v) sucrose in H2O DNA Size Migration with Sample Loading Dyes ~30bp ~100bp ~800bp 2.5-3.0 ~50bp ~300bp ~4000bp 0.7-1.7 Orange G Bromophenol blue Xylene cyanol FF Agarose concentration, % D-galactose and 3,6-anhydro-L-galactopyranose. *
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