c1091tunel细胞凋亡检测试剂盒显色法x-碧云天.pdf

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：order@ 技术咨询：info@ 碧云天网站 微信公众号 网址： TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 (显色法) 产品编号 产品名称 包装 C1091 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法) 20次 产品简介：  碧云天生产的显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速 简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤，即可在普通光学显 微镜下观察到凋亡细胞。  细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA 内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA 。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检 测，可以发现180-200bp 的DNA ladder 。基因组DNA 断裂时，暴露的3-OH 可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记 的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合，最后在HRP 的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜 检测到凋亡的细胞，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。  本试剂盒有如下优点。(1) 高灵敏度：背景染色极低，阳性染色强，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期 就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。(2) 特异性好：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死 细胞。(3) 快速：仅需约2-3个小时即可完成。 (4) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以 检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。(5) 实测效果好：参考图1。 图1. 本试剂盒的检测效果图。A. HeLa细胞未处理或用DNase I室温孵育10分钟后的检测效果图。B. Hela细胞未处理或用 10μM喜树碱(Camptothecin)处理24小时后的检测效果图。图中棕褐色为DAB染色阳性细胞。本图中的染色实验均在12孔板中 进行。本图仅作参考，不同的样品不同的检测条件，实际获得的结果可能和上图有较明显的差别。  TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同) 。 这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。  极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要 严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。  本试剂盒足够检测20个样品。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 C1091-1 TdT酶 100μl C1091-2 Biotin-dUTP