2010蛋白质123.pptVIP

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脯氨酸和茚三酮反应生成蓝紫色吗? Sanger反应(二硝基氟苯法) 黄色产物 * 应用: 鉴定多肽链的氨基末端氨基酸 异硫氰酸苯酯,PITC 苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-氨基酸) 苯氨基硫甲酰衍生物(PTC-氨基酸) 苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-氨基酸),无色,可以用层析法分离鉴定。 用途:鉴定多肽链氨基末端AA;蛋白质测序 氨基酸的重要呈色反应 茚三酮反应: 茚三酮试剂 蓝紫色产物 Sanger反应: DNFB 黄色产物(DNP-氨基酸) 艾德曼(Edman)反应: PITC 白色产物(PTH-衍生物) 小结:氨基酸的理化性质 (一)、氨基酸的构型和旋光性 (二)、氨基酸的吸收光谱 (三)、氨基酸的酸碱性(难点) (四)、氨基酸的重要呈色反应 第三节 肽(peptide) 肽键:一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的 α-氨基脱去一分子水缩合后形成酰胺键. 肽的结构特点 1. 肽链为不分支的线性结构,有方向性。 2. 一般有两个末端:氨基末端,羧基末端。 3. 不同肽链,其共价主链结构相同。 肽的命名与方向 丝氨酰甘氨酰酪氨酰丙氨酰亮氨酸 SGYAL 天然活性肽 催产素 * * * 非蛋白质氨基酸 小结 蛋白质基本结构单位:L-?-氨基酸 ?-氨基酸:脯氨酸(亚氨基酸)除外 L-氨基酸:甘氨酸(无不对称C)除外 氨基酸结构通式: 常见氨基酸种类:20种。 小测验: 1含芳香环的氨基酸 2含杂环的氨基酸 3含羟基氨基酸 4含硫的氨基酸 5含酰胺基氨基酸 6酸性氨基酸 7碱性氨基酸 8亚氨基酸 9极性非极性边界氨基酸 小测验: 1含芳香环的氨基酸 :Phe(F),Trp(W),Tyr(Y) 2含杂环的氨基酸:His(H), Trp(W), Pro(P) 3含羟基氨基酸:Ser(S),Thr(T), Tyr(Y) 4含硫的氨基酸:Met(M),Cys(C) 5含酰胺基氨基酸: Asn(N),Gln(Q) 6酸性氨基酸:Asp(D),Glu(E) 7碱性氨基酸:Lys(K),Arg(R), His(H) 8亚氨基酸: Pro(P) 9极性非极性边界氨基酸:Gly(G),Ala(A) 第二节Amino acids 二、氨基酸的理化性质 (一)、氨基酸的构型和旋光性 (二)、氨基酸的吸收光谱 (三)、氨基酸的酸碱性 (四)、氨基酸的重要呈色反应 构型(configuration):一个分子由于其中各原子特有的固定的空间排列,而使该分子所具有的特定的立体化学形式。 不对称碳原子 (一)、氨基酸的构型和旋光性 20种氨基酸的分子结构 Gly无手性C原子,无旋光性。 Thr和Ile有2个不对称C院子,4种光学异构体。 其余17种氨基酸有2种光学异构体。 构成蛋白质的氨基酸均属L-型,但旋光性为右旋d(+)或左旋 l(-)。 氨基酸的构型与旋光性 20种氨基酸在可见光区域均无光吸收,但在远紫外区(220nm)均有光吸收. 在近紫外区有显著紫外吸收(220-400nm)的氨基酸: Tyr 275nm Phe 257nm Trp 280nm (二)、氨基酸的吸收光谱 ? 蛋白质的最大光吸收一般在280nm,可以利用分光光度法快速测定蛋白质的含量。 1、氨基酸在水溶液中以兼性离子形式(偶极离子)存在。 (三)、氨基酸的酸碱性 概念: 在氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷,由于正负电荷互相中和而呈电中性,这种形式称偶极离子。 2、氨基酸既是酸(质子供体)又是碱(质子受体) 甘氨酸的滴定曲线 解离常数K1代表氨基酸羧基解离情况。 pK1等于羧基解离一半时的pH值。 解离常数K2代表氨基酸氨基解离情况。 pK2等于氨基解离一半时的pH值。 从滴定曲线理解 Henderson-Hasselbalch公式 pK值就是某种解离基团有一半解离时溶液的pH值 习题 向1.0L,1.0mol/L处于等电点的甘氨酸溶液中加入0.3mol/L的NaOH,所得溶液的pH值是多少?(pK1=2.34,pK2=9.60) 3. 氨基酸的等电点 在某一pH环境中,氨基酸解离成阳性离子及阴性离子的趋势相等,所带净电荷为零,在电场中不泳动。 此时,氨基酸所处环境的pH值称为该种氨基酸的等电点(pI)。 等电点的计算 丙氨酸的滴定曲线 谷氨酸的滴定曲线 赖氨酸的滴定曲线 等电点的计算 ◆中性氨基酸: pI = 1/2 ( pK1 + pK2 ) ◆酸性氨基酸: pI = 1/2 ( pK1 + pKR ) ◆碱性氨基酸 pI

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