名校联盟河北省元氏一中高三生物《DNA重组技术的基本工具》课件.ppt

●基因工程又叫做DNA重组技术。 ●是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 ⒈载体的作用：将外源基因送入受体细胞 2.载体需要的条件 　　⑴有1~多个限制酶切点 　　⑵对受体细胞无害 　　⑶导入基因能在受体细胞中复制、表达 　　⑷有某些标记基因，便于筛选 (5)结构简单，大小适中。 3.常用运载体种类： 　 ⑴细菌的质粒 　 ⑵噬菌体或某些动植物病毒 小结 质粒在大肠杆菌有什么作用呢？既然是DNA就能有性状----质粒不能单独存活，必须在大肠杆菌的细胞质中才能复制（需要的酶，原料都来自大肠杆菌细胞质），存活。 * * 密码子在生物界是　　　的！ * 因此要出现新的性状（蛋白质），只需要导入基因就可以。需要转录和翻译。翻译成氨基酸时候，需要以MRNA为模板，三个相邻的碱基构成？ * 1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的遗传密码，1966年霍拉纳用实验加以证明。 * * 质粒： 裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体（即拟核DNA）之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 (三) “分子运输车” —— 基因进入受体细胞的载体 (三) “分子运输车” —— 基因进入受体细胞的载体 1、通常以质粒作为载体 质粒——细菌细胞中一种很小的环状DNA分子。 裸露的、结构简单、独立于细菌之外，并且有自我复制能力 氨苄青霉素抗性基因 质粒 拟核 大肠杆菌细胞 目的基因插入位点 复制原点 运载体：常用质粒 1、质粒结构简单，大小适中 2、能自我复制并在受体细胞中稳定存在 3、有一个或多个限制酶切点 4、有特殊的遗传标记基因 注意：真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。 裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体（即拟核DNA）之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 质粒特点： 抗Amp 含有Amp的培养基 基因工程 的工具 限制酶 主要存在于原核生物中 具有专一性(识别序列) 切开DNA分子的磷酸二酯键 DNA连 接酶 连接磷酸二酯键 种类 E.coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶 运载 工 具 具备的 条件 结构简单,大小适中 能在宿主细胞中自 我复制并稳定存在 具一个多个限制酶切位点 具标记基因 质粒、 λ噬菌体衍生物 、动植物病毒 1)不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 练习 2）有关基因工程的叙述中，正确的是（ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的 核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的载体 C、载体必须具备的条件之一是：具有 多个限制酶 切点，以便与目的基因连接 D、DNA连接酶使黏性末端的碱基之间 形成氢键 C 练习 3）同一种限制酶切割成的黏性末端是 A. ①② B. ①③ C. ①④ D. ②③ A 2 7 4 8 3 6 1 5 练习 已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因，现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么？请设计实验、预期实验结果，并得出相应的实验结论。 对照组：不添加抗生素 实验组1：添加一定浓度的四环素 实验组2：添加一定浓度的氨苄青霉素 实验组3：添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素 练习 对照组 实验组1 实验组2 实验组3 结 论 预期一 ＋ ＋ ＋ ＋ 预期二 ＋ ＋ － － 预期三 ＋ － ＋ － 预期四 ＋ － － － 对照组：不添加抗生素 实验组1：添加一定浓度的四环素 实验组2：添加一定浓度的氨苄青霉素 实验组3：添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素 既含有抗四环素基因也含有抗氨苄青霉素基因 只含有抗四环素基因 只含有抗氨苄青霉素基因 既不含有抗四环素基因也不含有抗氨苄青霉素基因 3 种类 EcoRⅠ SmaⅠ 粘质沙雷氏杆菌 （Serratia marcesens） 大肠杆菌 （Escherichia coli R） 练习： 流感嗜血杆菌的d菌株( Haemophilus influenzaed )中先后分离到3种限制酶，则分别命