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* 真核生物与原核生物比,(1)聚合酶的种类变多,5种;(2)而且5种聚合酶普遍具有5’-3’外切酶活性;(3)功能分化更精细,更复杂。 * 外切酶-聚合酶;内切酶-连接酶;在DNA的复制、修复和重组过程中均起重要作用。 * * * 许多抗生素就是进攻细菌的回旋酶 许多抗生素就是进攻细菌的回旋酶 * 与复制叉移动方向相同——前导链;与复制叉移动方向相反——滞后链(冈崎片断) * 是根据病毒遗传物质复制过程划分的:正链RNA介导合成负链rna,负链rna再介导合成正链dna。负链rna直接介导合成正链dna。 * S 为分子在离心场中的沉淀速度,用斯维德伯格单位(沉淀单位,S)来表示。瑞典科学家,为确定大分子的分子量,发明了分析离心技术。 * 大自然的方式,64个组合表达20个意思,而且全部被使用。mRNA 中存储蛋白质的合成信息——遗传密码;密码的破译,1961年美国科学家开始,5年后完成。 * 氨基酰-tRNA 合成酶的高度专一性,能够识别特定氨基酸对应的碱基顺序——密码子 * 有三组不编码任何氨基酸,而是专司终止多肽合成,是起句号作用的三联核苷酸密码子,它们分别是UAG、UAA和UGA。此三组密码子不能被转移核糖核酸(tRNA)阅读,只能被肽链释放因子(termination factor)所识别。 第一节 DNA的复制 (2)DNA链的延伸 在DNA聚合酶III(poly III) 的催化下:(1)前导链按5’-3’方向连续合成;(2)滞后链按5’-3’方向先合成多个RNA引物,再延伸合成多个冈崎片断,最后连接起来。 第一节 DNA的复制 (2)DNA链的延伸 滞后链的模板折叠180度成环状围绕在DNA聚合酶III(poly III) 的一个催化位点上,使其合成的物理方向与前导链相同。 第一节 DNA的复制 (3)DNA复制的终止 ※ 环状DNA分子——复制终止位点,复制叉到此停止。两个子代DNA分子互相铰链在一起,拓扑异构酶II在其中一条上打开缺口,使两个子代DNA分开,然后将缺口连接起来。 ※ 线性DNA分子——复制叉到末端,自动终止,两个子代DNA自行打开。 第一节 DNA的复制 三、DNA的损伤与修复 化学诱变剂、紫外线和电离辐射可以引起基因突变和细胞凋亡,其化学本质是上述因素直接作用于DNA,造成其功能和结构的破坏。生物体具有系列起修复作用的酶系统: 1、光复活修复 第一节 DNA的复制 1、光复活修复 第一节 DNA的复制 2、碱基切除修复 第一节 DNA的复制 3、错配修复(复制过程中错配时,可以通过DNA聚合酶的3’→5’外切酶活性校正,如果该错误没有校正,可被细胞的错配修复系统校正) DNA甲基化酶催化(GATC)序列中的A甲基化 Mut S二聚体识别并结合到错配位置 Mut L二聚体与Mut S结合并沿DNA双链移动,形成突环,遇GATC止 Mut H(核酸内切酶)与Mut SL结合,在GATC处将未甲基化的单链切开,切除错配位置 第一节 DNA的复制 三、DNA的损伤与修复 3、错配修复 切除过程得解螺旋酶II和单链结合蛋白SSB帮助) 在DNA聚合酶III和DNA连接酶的催化下补平和连接成完整的修复链 第一节 DNA的复制 四、RNA指导下的DNA合成 以RNA为模板,合成DNA的过程称为逆转录,在逆转录酶的催化下完成。 1、RNA(逆转录)病毒与逆转录酶 (1)以RNA为遗传物质的病毒 (2)基因组由两条正链RNA组成,结构类似真核生物的mRNA( 5’有帽,3’有尾,中间为编码序列) (3)逆转录酶的功能 :依赖于RNA的DNA聚合作用;对RNA的H降解作用;依赖于DNA的DNA聚合作用。需要Mg2+ 和Mn2+为辅助因子,要求有模板和引物存在。 1970 年【美】H. M. Temin 和D. Baltimore发现,获 1975 年度诺贝尔生理学或医学奖。 第一节 DNA的复制 2、逆转录酶的作用机制 逆转录酶以基因组RNA为模板,宿主的tRNA为引物,按5’→3’方向合成出与模板互补的DNA(负链) 以RNA酶H活性将杂合链中的RNA序列降解,只留下DNA负链 第一节 DNA的复制 2、逆转录酶的作用机制 复合物与宿主DNA结合,整合酶随机切割宿主DNA链,使产生黏端,而后病毒DNA与宿主DNA对接,并由宿主的酶系统将末端修补,从而完成病毒DNA与宿主DNA的整合。 整合酶(integrase)与双链DNA结合,并除去其3’末端各两个核苷酸,形成5’突出的黏性末端 以降解的RNA片断为引物,以新合成的DNA为模板合成DNA正链,并降解tRNA,形成完整的DNA正链(双链DNA) 第二节 DNA指导下的RNA合成 一、核糖核酸(RN
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