用于肿瘤治疗的不同形貌的聚醚-聚酯胶束的研究-生物医学工程专业论文.docx

研究生优秀毕业论文西南交通大学四阐父逋大罕学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南交通大学可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复印手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1，保密口，在年解密后适用本授权书；2．不保密d使用本授权书。(请在以上方框内打“巾)指导老师签名：fq◇殳I／日期：砌与．s、留卜万方数据西南交通大学硕士学位论文主要工作(贡献)声明本人在学位论文中所做的主要工作如下：1．在mPEG．CL41聚醚．聚酯共聚物胶束制备过程中，加入一系列不同浓度的盐溶液，制备出不同形貌的胶束，通过原子力显微镜AFM、透射电镜TEM和激光共聚焦显微镜CLSM等对其形貌进行表征。选择类似杆状细菌病原体结构的两种不同长度的棒状胶束，并以球形形貌的胶束作对照，用纳米激光粒度仪DLS考察其在o．9％生理盐水中随时间变化的稳定性。选用抗癌药物阿霉素为药物模型，通过物理包裹法制备三种形貌的载药胶束，并分别在中性PBS和酸性ABS条件下，进行体外药物模拟释放。2．对三种不同形貌的载药胶束进行系列生物学评价，包括空白胶束细胞毒性、载药胶束的体外肿瘤细胞抑制效果、细胞凋亡情况和细胞吞噬情况，最后考察了不同形貌载药胶束的细胞内在化机理。体外生物学评价结果发现：聚醚．聚酯载体材料具有良好的生物相容性，三种不同形貌的载药胶束均能明显抑制人子宫颈癌细胞HeLaJ人肝癌细胞HepG2的增殖，并能诱导细胞发生凋亡，以短棒状载药胶束组的抑制效果最佳。并且研究发现胶束形貌对细胞吞噬和细胞内在化机理的影响至关重要。3．通过在Balb／c小鼠皮下建立小鼠肝癌细胞H22肿瘤模型，利用三种不同形貌的载药胶束，进行体内实验：药物血液清除曲线和药代动力学参数表明长棒状的载药胶束显著延长了药物在血液中的循环时间；药物体内分布显示，长棒状胶束显著增加药物在肿瘤部位的富集量，减少在正常组织的聚集浓度；另外，考察21天治疗期内小鼠体重、肿瘤体积和肿瘤重量变化来研究体内抗肿瘤效果，均发现：长棒状载药胶束组具有最佳的抗肿瘤效果及最高的安全性。原位末端转移酶标记技术TUNEL染色分析也表明，该组的肿瘤细胞凋亡特征最明显，凋亡率也最高，进一步从组织学水平证实了其抑瘤效果最佳。本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独立进行研究工作所得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明。本人完全了解违反上述声明所引起的一切法律责任将由本人承担。学位论文作者签名：折日期：劢压、s．为f万方数据论文工作得到以下项目资助国家自然科学基金聚醚一聚酸酐胶束的形貌调控及其对肿瘤细胞生长影响的研究国家自然科学基金具有三重形状记忆功能的高分子表面微图案及其与细胞作用机制国家重大科学研究计划(2012CB933602)多级微纳结构生物活性材料促进骨组织快速修复的研究万方数据西南交通大学硕士研究生学位论文第1页捅姜纳米载体在体内循环中的迅速清除目前仍是肿瘤治疗中面临的一大挑战。受到自然界中一些具有不对称形貌的病毒和细菌病原体对特异性的细胞具有很强的感染能力，尤其是一些杆状病毒如革兰氏阴性菌沙门菌和革兰氏阳性菌李斯特菌能够进入哺乳动物细胞中的启发，考虑将纳米载体制备成类似于细菌病原体的形貌，从而能够更好的应用于药物传递领域。在本论文中，我们通过在mPEG—CL4l聚醚．聚酯共聚物胶束制备过程中，加入一系列不同浓度的盐溶液，制备出不同形貌的胶束，通过原子力显微镜AFM、透射电镜TEM和激光共聚焦显微镜CLSM等对其形貌进行表征。选择类似杆状细菌病原体结构的两种不同长度的棒状胶束：短棒状SR和长棒状LR，并以球形形貌的胶束S作对照，用纳米激光粒度仪DLS考察其在o．9％生理盐水中随时间变化的稳定性。在所考察的120h内，三种形貌的胶束的平均粒径和粒径分布均没有明显变化，说明其稳定性很好。选用抗癌药物阿霉素作为药物模型，长棒状胶束的载药量达到8．4％，短棒状和球形依次为7．3％和4．5％。体外模拟药物释放结果显示，在酸性条件下，棒状胶束能够实现药物快速稳定的释放。然后，对三种不同形貌的载药胶束进行系列体外生物学评价，结果表明：聚醚一聚酯载体材料具有良好的生物相容性：三种不同形貌的载药胶束均能抑制肿瘤细胞HeLa／HepG2的增殖，并能诱导细胞发生凋亡，以短棒状载药胶束组的抑制效果最佳；在细胞的吞噬研究中，发现棒状胶束相比球形胶束更容易被我们所研究的两种肿瘤细胞HeLa／HepG2所摄取，并且从TEM超薄切片