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《微生物工艺技术》 培养基制备技术③ 五、淀粉酶解制备葡萄糖的工艺技术 ?（一）淀粉酶解法工艺原理 ? 酶解法是用专一性很强的淀粉酶和糖化酶作为催化剂将淀粉水解成为葡萄糖的方法，可分为液化过程和糖化过程，由于淀粉的液化和糖化都在酶的作用下进行的，故酶解法又称为双酶法。 ? 1. 液化原理 ? 淀粉颗粒的结晶性结构对酶作用的抵抗力非常强，α-淀粉酶不能直接作用于淀粉，在作用之前，需要加热淀粉乳，使淀粉颗粒吸水膨胀、糊化，破坏其结晶性的结构。 ? α-淀粉酶 ? 2. 糖化原理 ? 糖化酶是一种外切型淀粉酶，能从淀粉分子非还原端依次水解α-1，4糖苷键和α-1，6糖苷键。 ? 糖化过程过程中，葡萄糖的含量不断增多，其变化趋势如下： ?（二）酶解制备葡萄糖的液化工艺 ? 液化工艺类型 ? 一次加酶喷射液化流程 ★ Novo公司流程： ★ Novo公司流程的工艺条件 ★ 丹麦DDS公司流程： ★ 丹麦DDS公司的工艺条件 ★ 调浆、调节pH与添加淀粉酶 ★ 喷射 ★ 喷射 ? 喷射器 ★ 闪冷与维持 ★ 液化程度检测 思考题 ★ 1. 绘出一种液化工艺流程，并简要说明各步骤的工艺条件。 ★ 2. 液化酶的用量应如何控制? ★ 3. 为什么要控制液化程度? 应如何控制液化程度? ★ 4. 在工业生产中，怎样判断液化终点? 碘显色反应 无水乙醇检测 DE值检测 根据生产经验，DE值一般控制在10~15% 为什么要控制液化程度？ 怎样控制液化程度？ 影响糖化速度 液化程度 过低 引起液化液老化 影响糖化质量 液化程度 过高 液化分子过小 不利于糖化酶结合 影响糖化酶的催化 控制 液化程度 淀粉酶用量 喷射温度 维持温度 液化时间 布置 任务 制定淀粉酶解法制备葡萄糖的 糖化工艺流程，以及确定各步 骤的控制参数。 要求：每位同学准备5-10min 的PPT讲稿，下次上课讨论。 * * * * 酶制剂的主要来源 微生物发酵 葡萄糖 α-淀粉酶 α-1,4糖苷键 α-1,6糖苷键 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 α-淀粉酶是内切酶，从内部任意切开α-1,4糖苷键 液化产物 麦芽糖、葡萄糖、一系列 带有α-1,6糖苷键的寡糖。 α-淀粉酶作用完全时， 淀粉失去黏性， 无碘的显色反应。 按操作 间歇式 半连续式 连续式 按设备 管式 罐式 喷射式 按α-淀粉酶制剂的耐温性 中温酶法 高温酶法 中温酶与高温酶混合法 按加酶方式 一次加酶 二次加酶 三次加酶 常见工艺 一次加酶连续喷射式的高温酶法 二次加酶连续喷射式的高温酶法 1—调浆罐；2—泵；3—喷射器； 4—维持管道；5—闪冷罐；6—泵；7—卧式隔板层流罐 30~32%（w/v） 6.5 固形物的0.1%（w/w） 105℃ 5~8min 闪冷至95℃ 隔板罐内维持60~120 min 淀粉乳浓度 pH 耐高温淀粉酶用量 喷射温度 管道保温 闪冷 闪冷后保温 Novo公司的一次加酶喷射工艺 项目 1—调浆罐；2—泵；3—喷射器； 4—闪冷罐；5—泵；6—立式层流罐 30~32%（w/v） 6.5 固形物的0.1%（w/w） 110℃ ——————— 闪冷至95℃ 层流罐内维持60~120 min 淀粉乳浓度 pH 耐高温淀粉酶用量 喷射温度 管道保温 闪冷 闪冷后保温 丹麦DDS公司的一次加酶喷射工艺 项目 淀粉乳浓度过高或过低是否影响液化效果？ 淀粉酶用量过高或过低是否影响液化效果？ 根据什么确定淀粉酶用量？ pH如何确定？ 淀粉乳 浓度过低 设备 生产能力 偏低 不影响液化效果 淀粉乳浓度过高或过低是否影响液化效果？ 淀粉乳 浓度过高 DE值偏低 酶解不完全 糊化不完全 近十年来，淀粉乳浓度提高幅度较大 喷射器改进 淀粉酶性能提高 取决于 例如：耐高温性 淀粉酶用量 以干淀粉计算 5~8 U/g干淀粉 受喷射温度、维持 时间等条件影响 当一切工艺条件、酶活力 单位等基本固定时，生产 中通常以固形物的百分比 表示。 宜选择淀粉酶最适作用pH值 为什么需要喷射器？ 喷射温度如何控制？ 喷射温度对液化效果有什么影响？ 有汽带液型和液带汽型 喷射器可以使淀粉乳与蒸汽混匀， 达到瞬间升温的作用。 提高喷射温度，有利于淀粉在短时间内 糊化，但对酶活力有一定影响。 调节阀门开度控制喷射温度与流量。 闪冷至淀粉酶作用的适宜温度。 采用管式维持或罐式维持，保证酶作用时间。 怎样保证酶作用时间？ 维持罐设计 ?——充满系数 V——维持体积 v——体积流量 一般维持时间60~90 min