人教版高中生物选修三－1.2基因工程的基本操作程序课件共42张PPT.ppt

1、检测与鉴定的目的 目的基因进入受体细胞后，是否可以稳定维持 和表达其遗传特性。 步骤四：目的基因的检测与鉴定 2、分子水平的检测 检测是否插入了目的基因 检测是否转录出了mRNA 检测是否翻译成蛋白质 3、个体生物学水平的检测 ——做抗虫或抗病的接种实验 ——抗原--抗体杂交 ——DNA分子杂交技术 ——DNA--RNA分子杂交技术 DNA 附着在膜上 硝化纤维素 加探针 报告基因（含荧光素分子） 变性 DNA杂交 （如检测SARS病毒等） a b c d 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。 受体细胞摄入DNA分子后，就说明目的基因完成了表达吗？ 若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。 基因工程的基本操作程序 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 1、从基因文库中获取目的基因 2、利用PCR技术扩增目的基因 3、化学方法人工合成 复制原点 + 目的基因 + 启动子 + 终止子 + 标记基因 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、显微注射法、Ca2+处理法 DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原—抗体杂交技术 分子检测外的个体水平鉴定 1.以下说法正确的是 （ ） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B.质粒是基因工程中唯一的运载体 C.运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D.基因控制的性状都能在后代表现出来 2.有关基因工程的叙述中，错误的是 （ ） A.DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B.限制性核酸内切酶用于目的基因的获得 C.目的基因须由运载体导入受体细胞 D.人工合成目的基因不用限制性核酸内切酶 C 练习 A 3.在遗传工程技术中,下列何种目的基因一般以直接分离的方法获得 A.人的胰岛素基因 B.蚕的蚕丝蛋白基因 C.芽孢杆菌的抗虫基因 D.菜豆储藏蛋白基因 C D 4.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （ ） A.能复制 B.有多个限制酶切点 C.具有标记基因 D.它是环状DNA 5.有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作为运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 6.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合 C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测和表达 D C 1.利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，联系前面有关细胞器功能的知识，结合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？ 有些蛋白质肽链上有共价结合的糖链，这些糖链是在内质网和高尔基复合体上加工完成的，内质网和高尔基复合体存在于真核细胞中，大肠杆菌不存在这两种细胞器，因此，在大肠杆菌中生产这种糖蛋白是不可能的。 2.β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。假如让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计？ 寻根问底： （1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA）。 （2）将cDNA前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上抗四环素的基因，构建成一个表达载体。 （3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。 （4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β-珠蛋白。 寻根问底—— （1）为什么要构建基因文库？直接从含有目的基因的生物体内提取不行吗？ 提示：构建基因文库是获取目的基因