人卵透明带蛋白3突变体的构建及其在毕赤酵母中的表达-发育生物学专业论文
,加即止口父习幻。邃护,山。由耽加一心。妞一撅,〔。以刃助,,山旧州七旧训,一一·,川一一加址一坟一朋加,一,,巧戈七硕切妞“一目录一前言“” ““ ” ”二““”“”…”……” “”” “ ” ……“ ””二””” “““ ” …“二“” “ “二…卵透明带研究概述……“……毕赤酵母表达系统概述……,蛋白质工程与定点诱变技术… 一……………、本研究课题的立论依据目的及意义………一“……本研究的技术路线……””……”……“……、二实验材料试剂和仪器“”“…” “ “““ ““” …“””““ “…“”” ““……””…”…,、主要材料…………………主要试剂……“……主要仪器……………”……三实验方法““””“”““““““”“”“ “““””“ ”“”“”“”””““一““ ”““ “”““””“““…重组质粒的构建…………通过重叠延伸对基因进行定点诱变……“……,,表达载体的制备……”…… ………,,外源基因与载体的双酶切…………,外源基因与载体的连接……………………,氯化钙法制备大肠杆菌和感受态细胞……,大肠杆菌和的转化………………,转化子的筛选和鉴定…………重组质粒在毕赤酵母中的表达“……酵母细胞的转化……阳性克隆的筛选与表达蛋白的鉴定… …,四实验结果“ “ ““…””“ “ ”“…“”” “” “””…“”“ ”““二“”“”“““”…”二““ “ ““二“,重叠延伸介导的基因的定点诱变… ……………重组质粒的构建及鉴定结果……重组质粒的序列测定结果……‘毕赤酵母的转化结果…………‘,,阳性克隆的鉴定结果…………、多拷贝转化子的筛选……………………‘目的蛋白的表达结果…………五讨论与小结“ ”””二”””“”“ ““…“”“ ““““”“” ” ””……“”””“”二“…““ “” …重叠延伸介导的定点诱变“……重组质粒的构建和鉴定……” …“……基因在毕赤酵母中的表达及其影响因素… …,小结……“…………参考文献…““”” ……”““……”” ”…““ “” …“ …“ ”…“““ ……“……“”“”……”…“ ,。附录一各种试剂的配制方法“““ ……“ “ ”““……“……“ ”…………附录二全长序列“二”””” ……“““二“ “…” ” ……“二“ “……””““ ” “附录三重组质粒测序结果…“……” ……“” ”“……“ “……” ……”“ ……““二。在校期间发表论文情况……“” ””“““ …““…“二“”“““” …” …““ ”“ …” ”“” “致谢““ …“ “ ”……”” ”……““ ””…“”……“””””“二““ ……”……“ ” ”“ “暨南大学硕士学位论文人卵透明带蛋白突变体的构建及其在毕赤酵母中的表达勺一前口卵透明带研究概述,,受精是生殖过程的关键环节通过免疫途径在体内诱发针对受精特异成分。的抗体就可阻断受精产生抗生育作用在受精特异的成分中卵透明带,。,是一个具有广阔前景的抗原哺乳动物卵透明带是包绕生长卵、母细胞排出卵子和分裂胚胎的一层细胞外半透明丝状体酸性糖蛋白基质它、。一一,在精卵识别结合和穿透的过程中以及阻止多精入卵和保护着床前胚胎方面都,起着重要的作用通过还原条件下的和电泳分析多数,。,哺乳动物的由三类糖蛋白构成并按电泳迁移率从小到大命名为、、和也有根据其基因大小命名为等在猪中还存在。,。和被认为是的部分降解产物或分子内二硫键的还原产物空间,、,结构上和在中并非呈杂乱混融状而是有其特定构型的,。,现通过电子显微镜分析得知和交互排列成锁状的异构二聚体,,、在其二级结构上交叉连接形成一种三维网状结构功能上被认为是,,,初级精子受体它能诱发精子顶体反应并能与顶体完整的同种属精子识别。、,结合精卵两受体互相识别结合诱发顶体反应这是受精过程中重要的一环。,也是不同种属精卵欲行受精难以跨越的第一道天然屏障在精子顶体反应。。,中起次级精子受体作用主要表现为顶体内膜能与结合使发生顶体反应,,的精子与维持结合力及穿透的能力这是第二道天然屏障由此可见·、、,异构聚合体在对精子识别粘附穿透的过程中发挥了连续性。。整体作用除个别情况外绝大多数不同种属的精子是不能穿透这一屏障。,,的而则主要发挥结构支撑功能把和横向连接起来,卵透明带蛋白疫苗被认为是一种很有前途的抗生育疫苗研究表明针。。对卵透明带蛋白的抗体是组织特异性的卵透明带蛋白作为一种细胞质基质为,,卵巢所特有因此抗卵透明带蛋白抗体不会与其它组织发生交叉反应卵透明、带蛋白的抗原决定簇由氨基酸序列糖基结构等组成在多种动物中存在相似,的抗原决定簇这是不同动物间的卵透明带蛋白抗原可以发生交叉反应的基础暨南大学硕士学位论文人卵透明带蛋白突变体的构建及其在毕赤酵
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