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官方说明书大鼠基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
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大鼠基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用
检测范围:7.8 ng/ml -500 ng/ml
最低检测限:19.5ng/ml
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠TIMP-1,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6 个月
预期应用:ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中TIMP-1
含量。
说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任
何影响。
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗TIMP-1 抗体的微孔中依次加入标本或
标准品、生物素化的抗TIMP-1 抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显
色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的
深浅和样品中的TIMP-1 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算
样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1.酶联板(Assay plate ):一块(96 孔)。
2.标准品(Standard):2 瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
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4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25 倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
需要而未提供的试剂和器材
1.标准规格酶标仪
2.高速离心机
3.电热恒温培养箱
4.干净的试管和Eppendof 管
5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
6.蒸馏水,容量瓶等
标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2 小时或4℃过夜后于1000g 离心20 分钟,取上清即可检
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