兴义矮脚鸡早期胚胎蛋白质差异性表达的初步研究-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

致谢本研究是在导师陈彬副教授的悉心指导下完成的。三年来，恩师对我的学习、生活给予了无微不至的关怀。从他身上我学到了做人就要踏踏实实的道理。在我感觉到最迷茫的时候，是您给予了我生活的信心和希望。您的教诲将使我终身受益。感谢傅筑荫教授三年来给予我的帮助，为我实验的顺利进行提供了极大的方便，同时在思想、生活上给予我以无微不至的关怀，再次谨向傅筑荫老师致以诚挚的谢意和崇高的敬意。感谢师母张小卿老师对我的关怀和鼓励。本研究主要是在贵州省农业科学院生物技术研究所重点实验室以及贵州大学动科院省部共建遗传育种重点实验室实施的。农科院刘作易院长以及朱国胜、陶刚、桂阳、刘永祥、杨友联博士在实验过程中给予了指导、关心与帮助。贵州大学科研鸡场为本实验研究提供了实验素材。在整个实验实施阶段，华时尚畜牧师，胡应发师傅在种蛋的筛选以及孵化等方面给予了极大的帮助。实验过程中得到张福平，陈祥，姜海波，张小雪，欧德元等老师的帮助。学习期间，徐厚强教授，刘若余教授，蔡慧芬副教授，张勇副教授，范佳佑老师等承担了大量的教学任务，谢谢他们。同窗好友田甜，李金杰，徐彩龙，余定标，李兴美，任珍珍，李秀富，李诗举，韩虎峰，黄涛等陪我度过了三年的美好研究生生活。农科院实验室朱茵老师，李丽师姐，梅丽，邱礽，樊家仪，马权，刘新建，胡拓，沈雪莲等在实验当中给予了帮助。师弟师妹朱丽莉，王文涛，林瑞意，闫秀明，陈玉珍，段丽霞，赵佳福、吴珮璐等在实验的的进行当中给予了帮助。最后，将本论文献给生我养我的爸爸妈妈。我的每一个进步无不凝聚着他们辛勤的汗水和期望，他们给予我的物质和精神的鼓励是我走到今天并将继续努力的动力。谢谢他们。目录致谢2部分缩写中英文对照5中文摘要6Abstract7前言8一文献综述91 蛋白质与蛋白质组学研究进展91.1 鸡蛋白质组研究111.1.1 国内鸡蛋白质组研究111.1.2 国外鸡蛋白质组研究122 蛋白质分离鉴定方法132.1 根据溶解度不同的分离方法132.2 根据分子大小差别的分离方法132.3 根据蛋白质带电性质进行分离142.4 根据蛋白质对固定在基质上金属离子亲和能力的不同进行分离153 蛋白质组学研究的相关技术153.1 双向凝胶电泳技术163.1.1 双向电泳技术原理163.1.2差异凝胶电泳(differencegelelectrophoresis,DIGE)163.1.3 样品制备173.1.4 等电聚焦173.1.5 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）183.1.6双向电泳的技术特点及存在的问题183.2 生物质谱技术193.2.1 蛋白质分子量的测定203.2.2 肽指纹谱测定213.3 蛋白质芯片213.3.1 蛋白质芯片的概念及原理213.3.2 蛋白质芯片的产生与发展223.3.3 蛋白质芯片的分类与构建233.3.4 蛋白质芯片的应用243.4 生物信息学分析243.4.1 生物信息学的产生与发展253.4.2生物信息学在蛋白质组学上的应用253.4.3 常用的蛋白质数据库26二材料与方法281 实验材料281.1 实验种蛋281.2 主要仪器设备281.3 主要实验药品281.4 蛋白样品的浓度检测281.5 主要药品及试剂的配制292. 实验方法322.1 蛋白样品的提取322.1.1 样品的处理322.2 双向电泳跑胶程序332.2.1 等电聚焦程序设置332.2.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳332.3 银染步骤34三结果与分析341 蛋白质提取液中蛋白含量检测结果342 同期发育60小时活胚与死胚的提取蛋白质组双向电泳图谱353 结果分析35四讨论51五结论55参考文献56部分缩写中英文对照英文缩写英文全称中文全名Cpcreeper匍匐鸡DNAdeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸2-DEtwo-dimensionalelectrophoresis双向电泳Kuspectrophotometricunit卡门单位kDakilodalton千道尔顿PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳ODopticaldensitydifference光密度差ORFortho-researchfoundation矫形外科研究基金会pHpowerofhydrogen酸碱度SDSsodium dodecylsulfate十二烷基磺酸钠IECionexchangechromatography离子交换层析IMACImmobilizedmetalionaffinitychrom-固定金属离子亲和色谱atography2D