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第一章 绪 论 本章内容 1.1 生物分离工程简介 1.2 生物分离工程的流程与单元操作 1.3 生物分离工艺的选择准则 1.4 生物工程下游技术的发展历程及发展趋势 1.1 生物分离工程简介 一、生物分离工程的基本含义 三、生物产品的特点 二、生物分离工程在生物工程领域中的地位 1.1 生物分离工程简介一、生物分离工程的基本含义 1.1 生物分离工程简介一、生物分离工程的基本含义 上游：菌种，基因工程，分子生物学，遗传学 中游：微生物发酵工程，动植物细胞工程 下游：生物分离工程 1.1 生物分离工程简介一、生物分离工程的基本含义 生物分离工程：回收生物产品分离过程原理与方法。是生物工程的一个重要组成部分。 生物化工产品系通过微生物发酵过程、酶反应过程或动植物细胞大量培养获得，从上述发酵液、反应液或培养液中分离、精制有关产品的过程称为下游加工过程（Downstream Processing） ； 它由一些化学工程的单元操作组成，但由于生物物质的特性有其特殊要求（如生物活性或热敏性），需要一些特殊的分离技术。 1.1 生物分离工程简介二、生物产品的特点 ① 产物浓度低 ② 组分复杂 a 大分子; b 小分子; c 可溶物; d 不可溶物; e 化学添加物。 ③ 产物稳定性差 a 化学降解(pH , 温度); b 微生物降解 （酶作用， 染菌） ④ 分批操作，生物变异性大 ⑤ 质量要求高 （药品或食品） 1.1 生物分离工程简介三、生物分离工程在生物工程领域中的地位 下游技术是生物制品产业化的必经之路和关键所在，它直接影响产品的纯度、收率和成本。 例：干扰素的纯化 工艺1：醋酸锌盐析（83.0%）?离子交换层析（62.7%）?硫酸铵盐析 （96.2%） ?铜鳌合层析（46.0%） ?疏水作用层析（78.3%） ?凝胶电泳（88.9%）? 总回收率=83.0%? 62.7% ? 96.2% ? 46.0% ? 78.3% ? 96.2%=16% 工艺2：硫酸铵盐析 ?免疫亲和层析?阳离子交换层析? 总回收率=81.0% 对于某些基因工程产品，其下游技术的成本甚至占总成本的70%-90%。 1.2 生物分离工程的流程与单元操作 一、生物分离工程的一般流程 二、生物分离工程的单元操作 三、非蛋白类杂质的去除 四、目标蛋白的表征和分析方法 1.2 生物分离工程的流程与单元操作二、生物分离工程的单元操作 ① 细胞回收技术: 絮凝，离心，过滤等 ② 细胞破碎技术: 球磨，高压匀浆，超声破碎等 ③ 初步纯化技术: 吸附剂，离子交换，沉淀（盐析 法，有机溶剂沉淀，等电点，沉淀剂），溶剂萃 取，两水相萃取，超临界萃取，逆胶束萃取，膜 分离技术 ④ 高度纯化技术: 各类层析，亲和，疏水，聚焦，离 子交换，结晶 ⑤ 成品加工：浓缩，除菌与热原，喷雾干燥，气流干 燥，沸腾干燥，冷冻干燥 1.2 生物分离工程的流程与单元操作三、非蛋白类杂质的去除 （1） DNA A 阴离子交换（pH 4.0) B 亲和层析（不被吸附） C 疏水层析（不被吸附） （2）热原 （蛋白质溶液中的去热原） A 生产过程无菌 B 所有层析介质无菌 C 所用溶液无菌 D 亲和层析（多粘菌素） （3）去病毒 A 加热 （60 C) B 过滤 C 灭活剂 1.2 生物分离工程的流程与单元操作四、目标蛋白的表征和分析方法 （1） HPLC （2） SDS（3） 氨基酸顺序分析 1.3 生物分离工程的选择准则 ① 步聚少 ② 次序合理 ③ 产品规格 （注射，非注射） ④ 生产规模 ⑤ 物料组成 ⑥ 产品形式： 固体—— 适当结晶， 液体——适当浓缩 ⑦ 产品稳定性 1.3 生物分离工程的选择准则 捕获——产品分离、浓缩及稳定化 中间纯化——去处大量杂质（蛋白、核酸、病毒、内毒素等） 精纯——达到最终纯度（去除痕量杂质、结构变异体、二聚体等） 注：纯化的方法和顺序依据目标产物的来源 和目标产物与杂质的理化性质而决定。 1.4 生物工程下游技术的发展历程及发展趋势 一、生物工程下游技术的发展历程 二、生物工程下游技术的发展趋势 1.4 生物工程下游技术的发展历程及发展趋势一、生物工程下游技术的发展历程 由此可见： “下游技术”是随着生物工业技术的发展而发展的，只有生物工业在发展过程中提出了新的要求，才可能促进下游技术的发展。 1.4 生物工程下游技术的发展历程及发展趋势一、生物工程下游技