血液中多缩葡糖浓度测定.pptVIP

血液中多缩葡糖浓度的测定 曾令发* 方法 理论方法 迈卡基/匹克法 新方法 * 理论方法 根据去掉血浆中的蛋白以后，所获得的碱性滤液中沉淀铜络合物，随后测定沉淀中沉积的铜 返回 * Metkaji和Pycjio法 离心作用于含多缩葡糖的血液并用yehephh取出血浆，将与获得的血浆体积相同的10%的三录乙酸加到血浆内；二次离心溶液，向离心液内加入94%的乙醇，将溶液比色，并根据已知浓度的多缩葡萄糖溶液制作的标准曲线进行计算。 * 理论方法和迈卡基/匹克法的缺点 理论方法 : 极费时间而且不准确，因为血液中往往也存在与铜形成络合物的其他物质 “迈”法 : 费劳力并占用相当长的时间（每一样品需一小时）。此外，方法不够准确，因为在加入乙醇后溶液的光密度不能保持恒定，而迅速 改变。 返回 * 推荐方法 目的：缩短测定时间并提高测定的准确度 方法：离心或静置含多缩葡糖的，用3.8%的柠檬酸钠，以9：1的比例稳定了的血液制剂。把0.1毫升预先制备的0.9%的NaCl溶液中的凝血酶溶液（活度为2.5单位/毫升）加到0.2毫升的被研究的血浆内。在凝血酶的作用下测定血浆的凝固时间。 * 原理 按照测定血液中多缩葡糖浓度的方法，包括用化学试剂处理原血液或起血浆，将样品用凝血酶溶液处理，测定凝血的时间并根据下式子测定多缩葡糖的浓度 [多缩葡糖]=at2+bt+c 式中t为凝血时间，a,b,及c 为考虑到多缩葡糖性质是系数。 * 好处：可以缩短分析时间达数分钟。此外，该方法减轻了劳力，因为它不要求第二次离心作用及制作标准曲线。由于在引用公式时利用了从前已知方法测定的血液中多缩葡糖的平均值。故提高了方法的准确度。 * 测定血液中多缩葡糖浓度用的系数 制剂 系 数 a b c 多聚甘氨酸 0.146 -5.57 53.13 复多聚甘氨酸 0.234 -10.15 110.0 * 血液样品的取样时间 凝血时间 血液中制剂的浓度 已知方法 推荐方法 多聚甘氨酸6% 制剂加入前 19.5± 0.2 ———— ———— 经过10分钟 10.3± 0.1 11.34± 1.03 11.24 2小时 12.4± 0.2 6.28± 1.5 6.51 4小时 15.1± 0.1 2.47± 0.6 2.31 复多聚甘氨酸10% 制剂加入前 21.7± 1.8 ———— ———— 经过10分钟 11.5± 1.05 24.9± 0.2 24.22 2小时 14.0± 0.8 13.2± 1.35 13.76 4小时 19.0± 1.0 2.83± 0.35 1.62 * 例题 例1. 取0.2毫升含有多聚甘氨酸的血浆，倒入0.1毫升的凝血酶溶液，用秒表测定时间，该时间为15.1秒。按公式计算血液中的多聚甘氨酸。 [多聚甘氨酸]=0.146*t2-5.57*t+53.13 =0.146*228.01-5.57*15.1+53.13 =2.31 所以，血液中多缩葡糖的浓度为2.31毫克/毫升 *