干扰素干扰素.PPT

小结 1、蛋白质工程崛起的缘由 2、蛋白质工程的原理： 中心法则的逆推 预期的蛋白质功能出发　　 推测应有的氨基酸序列　　　 设计预期的蛋白质结构 　找到相应的脱氧核苷酸序列 3、蛋白质工程的进展和前景 练习检测 1．蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（　　） Ａ．氨基酸结构 B．蛋白质空间结构 C．肽链结构 　　D．基因结构 Ｄ 2、蛋白质工程的基本流程正确的是（ ） ①蛋白质分子结构设计 ②DNA合成 ③预期蛋白质功能 ④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列 A.①→②→③→④ B.④→②→①→③ C.③→①→④→② D.③→④→①→② C 3、关于基因工程和蛋白质工程的说法正确的是（ ） A．都是分子水平上的操作 B．基因工程就是改造基因的分子结构 C．蛋白质工程就是改造蛋白质的分子结构 D．基因工程能产生自然界根本不存在的基因，蛋白质工程能产生自然界已存在的蛋白质 A 4、关于生物体内存在的天然蛋白质，下列说法不正确的是（ ） A．是生物在长期进化过程中形成的 B．它们的结构和功能符合特定物种生存的需要 C．构成天然蛋白质的氨基酸目前发现的有20种 D．一定完全符合人类生产和生活的需要 D 5、关于蛋白质工程的进展和应用，下列说法不正确的是（ ） A．科学家通过对胰岛素的改造，已使其成为速效药品 B．生物和材料科学家正积极探索将蛋白质工程应用于微电子方面 C．蛋白质工程技术已经非常成熟，目前正被大力推广应用 D．蛋白质工程是一项难度很大的工程，目前成功的例子不多 C * 基因工程的实质： 将一种生物的???? ????? 转移到另一种生物体内，后者产生它本不能产的??????? ，进而表现出? ? 。 基因 蛋白质 新的性状 回顾： 基因工程 的成果 基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 这些蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 基因工程的局限性： 科学家在干扰素的保存和玉米的赖氨酸的产量上面临什么样的问题？如何解决这些问题？ 一.蛋白质工程崛起的缘由 1.干扰素是一种抗病毒、抗肿瘤的药物。将人的干扰素的cDNA在大肠杆菌中进行表达，产生的干扰素的抗病毒活性为106 U/mg，只相当于天然产品的十分之一，虽然在大肠杆菌中合成的β-干扰素量很多，但多数是以无活性的二聚体形式存在。 2.玉米中的赖氨酸含量比较低,原因是合成赖氨酸的两个关键酶----天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性,受细胞内的赖氨酸浓度的影响较大,当赖氨酸的浓度达到一定量时,就会抑制这两种酶的活性. —相关资料： 例如:干扰素是一种抗病毒、抗肿瘤的药物。将人的干扰素的cDNA在大肠杆菌中进行表达，产生的干扰素的抗病毒活性为106 U/mg，只相当于天然产品的十分之一，虽然在大肠杆菌中合成的β-干扰素量很多，但多数是以无活性的二聚体形式存在。为什么会这样？如何改变这种状况？研究发现，β-干扰素蛋白质中有3个半胱氨酸（第17位、31位和141位），推测可能是有一个或几个半胱氨酸形成了不正确的二硫键。研究人员将第17位的半胱氨酸，通过基因定点突变改变成丝氨酸，结果使大肠杆菌中生产的β-干扰素的抗病性活性提高到108 U/mg，并且比天然β-干扰素的贮存稳定性高很多。 再如玉米中的赖氨酸含量比较低,原因是合成赖氨酸的两个关键酶----天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性,受细胞内的赖氨酸浓度的影响较大,当赖氨酸的浓度达到一定量时,就会抑制这两种酶的活性.如果将该酶的第352位的天冬酰胺变成异亮氨酸,将二氢吡啶二羧酸合成酶的苏氨酸变成异亮氨酸,就可以使玉米叶片和种子中游离的赖氨酸提高5倍和2倍 “后基因组时代”将是“蛋白质组学时代”，即从对基因信息的研究转向对蛋白质信息的研究，包括研究蛋白质结构、功能与应用及蛋白质相互关系和作用。 改造 干扰素（半胱氨酸） 体外很难保存 干扰素（丝氨酸） 体外可以保存半年 玉米中赖氨酸含量比较低 天冬氨酸激酶 （352位的苏氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺） 天冬氨酸激酶 （异亮氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸） 玉米中赖氨酸含量可提高数倍 改造 改造 问题1： 解决： 蛋白质功能 不能满足需求 改变蛋白质的结构 一、蛋白质工程崛起的缘由 -----半胱氨酸----- 体外很难保存 ？如何改造 ------丝氨酸------- 体外可以保存半年 问题2：如何对天然蛋白质的结构进行改造？ 干扰素 干扰素（改） (你认为直接对蛋