固体物料的输送设备.ppt

　　1.4 　细胞破碎设备 　　2．酵母菌细胞壁的组成与结构 酵母的细胞壁由葡聚糖（30%～34%）、甘露聚糖（30%）、蛋白质（6%～8%）和脂类（8.5%～13.5%）构成。细胞壁的结构可分为三层，最里层为葡聚糖层，它构成了细胞壁的刚性骨架，使细胞壁具有一定的形状。外层是甘露聚糖层。葡聚糖层与甘露聚糖层之间靠蛋白质交联起来，形成网状结构。酵母菌细胞壁厚约1.2μm，但不及革兰氏阳性菌细胞壁坚韧。幼龄酵母菌的细胞壁较薄，有弹性，以后逐渐变厚、变硬。 　　1.4 　细胞破碎设备 　　3．霉菌细胞壁的组成与结构 霉菌细胞壁厚度为100～250nm，主要由多糖组成（80%～90%），其次含有较少的蛋白质和脂类。大多数霉菌的细胞壁是由几丁质构成，其强度比细菌和酵母菌的细胞壁有所提高。 总之，细胞壁的组成以及它们之间相互关联程度决定着细胞壁的形状和强度，也是决定细胞破碎难易的主要因素。 　　1.4 　细胞破碎设备 1.4.2 常用破碎方法与设备 细胞破碎（即破坏细胞壁和细胞膜）使胞内产物获得最大程度的释放。由前面可知，通常细胞壁较坚韧，而细胞膜强度较差，易受渗透压冲击而破碎，因此破碎的阻力主要来源于细胞壁。各种微生物的细胞壁的结构和组成不完全相同，主要取决于遗传和环境因素，因此，细胞破碎的难易程度不同。另外，不同的生化物质，其稳定性亦存在很大差异，在破碎过程中应防止其变性或被细胞内存在的酶分解，所以选择适宜的破碎方法十分重要。 　　1.4 　细胞破碎设备 细胞破碎的方法很多，按是否使用外加作用力可分为机械法、化学和生物化学渗透法、物理渗透法等。机械法有珠磨法、高压匀浆法、超声破碎法、X-press法等。化学和生物化学渗透法有化学试剂处理和酶溶两种方法，破碎速率比机械法低，效率差，并且化学或生化试剂的添加形成新的污染，给进一步的分离纯化带来麻烦。物理渗透法有渗透压法、冻结融化法和干燥法等。常用细胞破碎方法见表1-1。 　　1.4 　细胞破碎设备 表1-1 常用细胞破碎方法分类 分 类 原 理 特 点 机械法 珠磨法 细胞被玻璃珠或铁珠捣碎 破碎率较高，可较大规模操作，大分子目的产物易失活，浆液分离困难 高压匀浆法 细胞被搅拌器劈碎 破碎率较高，可较大规模操作，但不适合丝状菌和革兰氏阴性菌 超声破碎法 用超声波的空穴作用使细胞破碎 破碎过程升温剧烈，不适合大规模操作，对酵母菌效果较差。 研磨法 细胞被研磨物磨碎 生 化 法 碱处理法 碱的皂化作用使细胞壁溶解 调节PH值，提高目标产物的溶解度 酶溶法 利用酶的分解作用 具有高度专一性，条件温和，浆液易分离，溶酶价格高，通用性差 化学渗透法 改变细胞膜的渗透性 具一定选择性，浆液易分离，但释放率较低，通用性差 物 理 法 渗透压法 渗透压的剧烈改变 破碎率较低，常与其它方法结合使用 冻结融化法 反复冻结融化 破碎率较低，不适合对冷冻敏感的产物 干燥法 改变细胞膜的渗透性 条件变化剧烈，易引起大分子物质失活 　　1.4 　细胞破碎设备 　　机械法因高效、价廉、简单等特点而被广泛用于工业中，但敏感性物质失活的问题、碎片去除以及杂蛋白太多等问题仍有待解决；物理和化学渗透法处理条件温和，有利于目标产物的高活力释放回收，但破碎效率较低，产物释放速度低、处理时间长，不适用于大规模细胞破碎的需要。超声波破碎法的有效能量利用率极低，操作过程产生大量的热，因此操作需在冰水或有外部冷却的容器中进行，对冷却的要求相当苛刻，所以不易放大，主要用于实验室规模的细胞破碎。 　　1.4 　细胞破碎设备 　　1．珠磨法 珠磨法是一种有效的细胞破碎法，珠磨机是该法使用的设备，其结构如图1-34示。进入珠磨机的细胞悬浮液在搅拌桨的作用下与微球充分混合，高速转动，微球与微球之间以及微球与细胞之间互相剪切、碰撞，使细胞破碎，释放出内含物。在珠液分离器的协助下，玻璃珠等微球留在破碎室内，浆液流出，从而实现连续操作。破碎中产生的热量一般采用夹套冷却的方法带走。 　　1.4 　细胞破碎设备 图1-34 珠磨机结构简图（DynoMil） 　　1.4 　细胞破碎设备 珠磨法细胞破碎可采用间歇或连续操作，设备的种类也很多，如WAB公司的Dyno-millKD45C型最大搅拌速度为1450r/min，破碎室体积为45ｄm3。 珠磨法的细胞破碎效率随细胞种类而异，但均随搅拌速度和悬浮液停留时间的增大而增大。特别重要的是，对于特定的细胞，存在适宜的微粒粒径，使细胞的破碎率最高。另外，悬浮液中细菌细胞浓度在6％～12％、酵母菌细胞浓度在14％～18％时破碎效果最理想。