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第四章 出发菌株的获取与选择 本章主要内容 工业微生物菌种选育的一般途径 (讲授) 出发菌株(原始菌种的)的来源 (讲授) 微生物的分离 (讲授) 菌株的筛选与鉴定 (讲授) 蜜柚脱苦酶产生菌的分离与筛选(实验) 一、工业微生物菌种选育过程 1、工业微生物生产菌株应具备哪些特点? (8点要求) 2、是不是任何一株具有某一经济性状的菌株都可以用作生产菌株? 实验室保存的枯草芽孢杆菌教学菌株是否能用于工业化生产细菌蛋白酶的菌株?? 为什么?? 二、从自然界分离出发菌株 1、分离的一般过程 采集微生物样品→预处理→培养→单菌落分离→选择单菌落→产物鉴定→菌种鉴定 目的:高效地获取一株高产目的产物的微生物 问题:如何使样品中所含微生物的可能性大, 如何在后续的操作中使这种可能性实现 4、单菌落的分离 划线法 平板涂布法 另外一种特殊的方法:组织培养法 显微操作单细胞分离培养法 * 3、工业微生物菌种选育的一般步骤 出发菌株→菌种选育提取→生产性能评估 →符合产业化要求→保存作为生产菌株 4、出发菌株的来源 从菌种保藏机构购买 从自然界分离 从传统产品中分离 从相关科研机构索取 2、采样时要注意的问题 气候、水分、空气 来源要广 结合产品的特点 标签:地点、时间、气候等 3、目的微生物富集的方法 富集的目的:让目的微生物在种群中占优势,提高筛选效率。 富集的三种方案: (1)定向培养:采用特定的有利于目的微生物富集的条件,进 行培养。 物理方法:加热、膜过滤等 控制培养条件及培养基成分。 定向培养的富集方法 1、底物 2、pH条件 3、培养时间 4、培养温度 等一切能提高目的微生物相对生长速度的手段,培养(固体、液体;分批连续)后使目的微生物在种群中占优势。 (2)当不可能采用定向培养时,则可在一个分类学中考虑。 细菌 放线菌 酵母菌 丝状真菌 (采用适当的前处理与培养基) (3)不能提供任何有助于筛选产生菌的信息,这时只能通过随机分离的办法。 (什么是随机分离???) 5、菌落的选出 从产物角度出发 在培养时以产物的形成有目的的设计培养基 利用简单、快速的鉴定方法,如抗生素(P35) 从形态的角度 菌落的外观形态,是微生物的一个重要表征。如多糖产生菌在适当的培养基上生长,从具有粘液性的菌落外观上就可以初步识别。 去除表土 *
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