微生物学培养与药敏试验（真菌）.pptVIP

微生物学培养与药敏试验（真菌）　 　　随着细菌耐药性的不断变化，新抗生素的开发和实验室技术的发展，尤其是面对新的日益增多难对付的病原菌(ESBLS、MRS、MRSA、VRE等)的分析和鉴定。我们深感微生物学与临床医学之间的沟通和交流是非常必要的。这样既有利于医生对感染性疾病的诊疗工作，又可提高医疗水平的检验质量。 细菌系统学或分类学 系统学：是活的生物体的分类的科学，包括 三个方面： 分类 命名 鉴定 　 1. 分类：界、门、纲、目、科、属、种、型、株 分类方法 1959：数字分类 1969：使用DNA-DNA杂交技术 1975：rRNA序列比较——先根据杂交、 后进行分类和序列分折，提供了将细菌的种以系统发 育树排列的方法。 　 2．命名——双命名法 第一个是属名（第一个字母大写） 第二个是种名（第一个字母小写） 3．鉴定——已发表的种、属、科等的表型特征进 行比较的结果 ? 　二、?????? 临床常见细菌分类 革兰氏染色将细菌分为四大类（需氧菌） ? 革兰氏阳性球菌：葡萄球菌属——32个种和15个亚种 微球菌——6个属，微球菌属有2个种 链球菌属——溶血、血清、rRNA序列比较、 肠球菌属——17个种 革兰氏阴性杆菌：革兰氏阴性需氧菌 肠杆菌科菌——1000多种 非发酵菌——1000多种 弧菌科菌——3个属菌 革兰氏阴性球菌：——3个属、2个种 革兰氏阳性杆菌：革兰氏阳性无芽孢杆菌 棒杆菌属——31个种与医学有关 李斯特菌属——1个种 需氧放线菌属——18个属 分枝杆菌属——80多个种 革兰氏阳性无芽孢杆菌——50个种 放线菌属——18个属与医学有关 三、正确的采集的处理标本是分离出目的病原微生物的前提 1. 在采集血液、脑脊液或穿刺液时应严格注意无菌操作，避免杂菌污染。采集粪便、肛拭子的鼻咽拭子等标本时，虽无须严格无菌手续，但也应置于灭菌容器内，尽可能避免标本外细菌混入。 2.?应在使用抗菌药物前采集病人标本。（血培养中含树脂可中和抗菌素） 3.?盛标本的容器须先经灭菌，但不得用消毒剂或酸类处理。 4.尽快送检　容器上应贴有送检号和病人姓名的标签。标本采集完毕后应尽快送检，搁置时间长会影响检验结果。如不能立即送检，一般应予以冷藏保存送检。某些检本（如淋病奈瑟氏菌和脑膜炎奈瑟氏菌）在送检过程中应注意保温。抽血后的培养瓶不能放冰箱。 5. 有些临床标本还要注意采集时机和部位　（痰标本应尽量从深部咳出，TB标本应早晨从深部咳出），采集耳、鼻、咽拭子时易被粘膜上的正常菌群污染，应先用无菌生理盐水冲洗后采集标本。 6. 采集、包装、送检过程中要注意安全　由于病人标本很可能含有大量致病菌，故在采集、包装和送检时都必须注意安全，防止污染、传播和自身感染。同时，标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须盖紧和包好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。 7. 血培养应注意 7.1 采血时机： 采血最好在病人寒颤发烧前半小时，此时血液中细菌量最多，当病人发烧后再采血，多数细菌已裂解死亡，使培养阳性率降低。 7.2 采血次数： 据实验研究：培养1次分离率占80％，培养2次分离率为90％，3次培养分离率达到99％。（一次培养到表皮葡萄菌应慎重。） 　7.3 采血量： 成人采血量为5-10ml；儿童1-3ml 采血量在一定程度上与培养阳性成正比（每增加1ml 血液=增加3%的敏感度）通常血液与培养基的比例为1:5-1:10（稀释血液中的抗生素或抗体成分）。 7.4 血培养瓶适合各类无菌体液标本增菌 无菌体液经过增菌培养大大提高了阳性率.(风湿科周××脑脊液标本用常规方法培养为无细菌生长,采用增菌的方法培养三次均为新型隐球菌). 无菌体液包括: 骨髓、血液、脑脊液、胸水、腹水、关节液、心包液、玻璃体液、泪管积液、脑组织液、浸出液、渗出液、深部脓液、羊水、腹膜透析液、血浆引流液、等等,均可采用增菌的方法培养. 7.5 血培养阳性的多极报告方式 　　一级报告: