细胞化学染色检验-余江.pptVIP

脱氧核糖核酸（DNA）染色 实验原理： 脱氧核糖核酸在60℃酸性溶液中可以使脱氧戊糖释放出醛基，与雪夫试剂作用生成红色物质。胞核含有DNA，故染成红色 正常血细胞的染色反应： 胞核染成浅红色或紫红色，胞浆与核仁均为阴性反应。 幼稚细胞染成浅红色，呈细小的散在颗粒状；成熟细胞染色较深，聚集成块状。 临床意义： 1.帮助识别细胞的成熟程度； 2.帮助鉴别急性白血病的类型； 3.帮助鉴别巨幼红细胞与正常红细胞； 核糖核酸（RNA）染色 实验原理： RNA可被多种碱性染料所染色，呈嗜 碱性。如甲绿将核（DNA)染成绿色，派洛宁将胞质(RNA)及核仁染成红色。 正常血细胞的染色反应： 核糖核酸染成不同深度红色（量多色深），分布于胞质与核仁中，核染成蓝绿色。 总体规律：随细胞的成熟其阳性程度减低。 （淋巴和浆细胞除外） 临床意义： 1）造血组织增生旺盛时，造血细胞的RNA含量都明显增高。如：IDA、MA、溶血性贫血的幼红细胞，白血病幼稚细胞。 2）再障时造血组织的RNA含量显著降低。 3）成熟中性粒细胞RNA的含量变化： 增高：感染、白血病、霍奇金病、恶性贫血和血小板减少性紫癜。 降低或正常：再障、缺铁性贫血、放射病后及PNH。 氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色 实验原理： 血细胞中的氯乙酸AS-D萘酚酯酶将基质液中的氯乙酸AS-D萘酚水解，产生萘酚AS-D，进而与基质液中的坚牢酱紫GBC偶联，形成不溶性红色沉淀，定位于胞质内。 正常血细胞的染色反应： 1）粒细胞系统： 2）其他细胞：单核细胞为阴性反应，个别阳性。浆细胞、淋巴细胞、幼红细胞和血小板均阴性。 临床意义： 帮助鉴别急性白血病的类型： 急粒原始细胞为阳性反应。 急淋和急单为阴性反应。 粒单时部分阳性，部分阴性。 α醋酸萘酚酯酶染色 实验原理： 血细胞中的α醋酸萘酚酯酶将基质液中的α醋酸萘酚水解，产生α萘酚，萘酚再与坚牢蓝B偶联，形成不溶性灰黑色或棕黑色沉淀，定位于胞质中。 * * 细胞化学染色检验 四川大学华西医院实验医学科 临检血液室 余 江 细胞化学染色检验的原理： 将化学反应和细胞形态学结合起来应用涂片染色的方法，观察细胞的化学成分及其变化的重要方法。 细胞化学染色检验的意义： 1) 研究生理和病理情况下细胞化学成 分的变化; 2) 各种类型血细胞的鉴别； 3）血液病的鉴别诊断； 4）疾病的疗效观察； 过氧化物酶染色 实验原理： 血细胞内的过氧化物酶（peroxidase,POX） 能够分解过氧化氢，释放出初生态氧，使无色联苯胺氧化成蓝色联苯胺，后者再进一步变成棕黑色化合物，沉着于胞质内。 正常血细胞的染色反应： 1）粒细胞系统： 2）单核细胞系统： 3）其他细胞： 临床意义： 1.帮助鉴别急性白血病的类型 1）急粒和急淋及急单的鉴别： 一般情况下：急粒原始细胞（＋） 急淋、急单原始细胞（－） 2）小型原粒和原始淋巴的鉴别： 3）急性早幼粒细胞白血病和急性单核细胞 白血病的鉴别： 4）急性单核细胞白血病和恶性组织细胞病 或组织细胞白血病 2.成熟中性粒细胞过氧化物酶活性的变化： 1）活性增高： AA 、 ALL、CLL、感染等 2）活性减低： 急粒、急单、慢粒、MDS 、放射病 及退化中性粒细胞 苏丹黑B染色 实验原理： 苏丹黑 B（Sudan black B）是一种脂溶性染料，可溶解于细胞质内的含脂结构中，使胞质中的脂类物质呈棕黑色或深黑色颗粒。 正常血细胞的染色反应： 1）粒细胞系统： 2）单核细胞系统： 3）其他细胞： 临床意义：同POX染色 苏丹黑反应比过氧化物酶反应敏感 过碘酸－雪夫反应（糖原染色） 实验原理： 过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成双醛基，醛基再与Schiff氏液的无色品红结合，形成紫红色化合物，定位于含有多糖类物质的胞浆上，红色深浅与细胞内能反应的乙二醇量成正比。 正常血细胞的染色反应： 1）粒细胞系统： 随成熟度逐渐增强 2）红细胞系统： 均为阴性 3）单核细胞系统： 随成熟度逐渐增强 4）淋巴细胞：大多阴性 5）巨核细胞和血小板： 巨核细胞为阳性，红