基因工程:即 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里, 地改造生物的 。 第一步: * 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 §6.2基因工程及其应用 原 理: 操作水平: 结 果: 目的基因 供体细胞 受体细胞 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 获得新性状 基因拼接技术或DNA重组技术 定向 遗传性状 二、基因工程的工具 1、基因工程的 指“ 限制性内切酶 ” 主要存在于微生物 一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割 已发现的有200多种 种类: 来源: 特点: “ ” 这个特点说明了: 酶具有专一性 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 思考: 形成的黏性末端不同 不同的限制酶呢? 具有。 GAATTCCGTAGAATTCGGATT 尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端 CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 2:基因工程的 指“DNA连接酶” “ ” 作用: 连接“梯子”断口的“扶手”而非“梯子”中间的“踏板”。 其作用与限制性内切酶相反,作用点相同 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 3、基因工程的 目的基因 A、 条 件: 1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存 2、具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接 3、具有标记基因,便于进行筛选 B、常用的 运载体: 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 标记基因,便于进行检测。 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞拟核外或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子. C、它们的共同特点是: 都有侵染或进入宿主细胞的能力 三、基因工程基本步骤 第二步: 获取目的基因 目的基因与运载体结合 方法: 1、直接分离:鸟枪法 2、人工合成: 注意:要保持基因的完整性 注意:要用同一种限制酶切取目的基因和运载体,并用DNA连接酶连接。 第三步: 第四步: 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达 1、常用的受体细胞: 微生物、动植物细胞等 微生物增殖快、代谢快、目的产物多 一般检测: 目的基因是否成功导入受体细胞 并成功地表达出产物 2、常用微生物作受体细胞的原因: 细菌和人是差异非常大的两种生物, 通过基因重组后,细菌能够合成人体的胰岛素,这说明了什么? 这可不是普通的细菌,它是嫁接了人胰岛素基因的工程菌,能大量合成人胰岛素。 人和细菌共用一套遗传密码 所有生物共用一套遗传密码 (多选)下列有关基因工程技术的正确叙述是( ) A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B.一种限制酶都只能识别特定的核苷酸序列 C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 * * *
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