纳米细菌研究进展.ppt

BY Fuquan Hoo 一.微生物新种类的出现不断刷新我们 对生命本质的认识 一个东西是否具有生命，是一个大是大非的问题，它涉及到人类对生命本质的认识.在医学实践中，如果我们对生命本质无法把握，不知道什么算是有生命的，一个生命什么时候开始，什么时候结束，那就会带来极大问题。遗憾的是目前我们人类正处于这种状态。 （一）Kajander 一派人的基本观点 纳米细菌与疾病 Nanobacteria: Facts or Fancies? Pasquale Urbano and Francesco Urbano： PLoS Pathogen, 3(5); May 2007 * 纳米细菌（Nanobacteria） 对生命本质认识的新挑战 第三军医大学微生物学教研室 有人会说，有生命的东西具有新陈代谢、生长繁殖 的基本特征，据此可以判断一个东西是否是有生命的。 其实不然，很多例子可以突破上述生命的基本特征。 微生物新种的不断出现就一次又一次突破我们对生 命本质的认识，使我们对那些处于生命与非生命边缘 的东西无法做出判断。 在微生物发现之前，人们认为，有生命的东西至少是看得见摸得着的，细菌的发现突破了这一界限。 后来人们认为，生命至少应该至少是一个细胞吧？但非细胞型生物－病毒的发现有突破了这一界限。 恩格斯曾经曾经说过说“生命是蛋白质和核酸的复合体”，病毒还复合这一界定。 但当只有核酸而无蛋白质的“类病毒”（viroids）出现后，又使人们大吃一惊。但还可以想象，因为只要有核酸，就可以翻译出蛋白质来的。 但当只有蛋白质而无核酸的“朊病毒”（prion）出现的时候，我们更加瞠目结舌！这朊病毒是有生命的吗？如果是，没有遗传物质，它是怎么遗传的呢？ 一次又一次微生物新种的出现，不断颠覆我们对生命本质的认识，我们不得不问： 什么是最简单的生命形式？ 最简单的生命可以简单到什么程度？ 生命最本质的定义是什么？ 对这些关乎生命的根本问题，我们还无法回答。 二.“纳米细菌” 的出现再次引起轩然大波! 芬兰人Kajander 及 Ciftcioglu 1998年在 PNAS上报道：他们发现了一种前所未有的生命形式，几何尺度在纳米水平，称为“Nanobacteria”, 它有生命，可以复制，是一种传染性因子，可引起人类结石病、硬皮病、动脉粥样硬化、冠心病等疾病。 下面，我们先介绍 Kajander 等人这一方面的发现与观点，再介绍反对的观点。 1992年，芬兰科学家 Kajander 等在进行哺乳动物细胞培养时,发现在没有细菌污染的情况下，仍有部分细胞生长繁殖不佳, 发生空泡样变性、溶解或凋亡，于是对这些细胞进行透射电镜观察，结果在细胞内发现了一种很小的原核微生物，其直径约 50～200 nm，称为Nanobacteria，并申请了专利。 纳米菌约50～200 nm，能通过细菌滤器。革兰染色阴性,呈球状或球杆状,壁很厚。 纳米菌在普通培养条件下不能生长，而在RPMI1640 或DMEM培养基中能够生长，加入10％胎牛血清能促进其生长。 生长后表现为贴壁很紧的颗粒和沉淀，可芽生生长、断裂生长，生长缓慢，在有血清培养基中代时为3天，无血清培养基中代时6天，1月左右才能培养可见结果。 基本生物学特性 特别引人注目的是，纳米细菌可诱导环境中的钙、磷在菌体外沉积，生成羟磷灰石碳酸盐结晶，形成坚硬的矿化外壳，使其耐受高温和强酸，即使在90℃高温或1N HCl中也能存活。 纳米菌的外层磷灰石结晶，构成很厚的壁（是一般细菌细胞壁厚度的2倍）。厚壁外表面形成粘性物质，菌体相互粘附，形成生物膜（biofilm)样结构。 纳米菌的矿化外壳经由傅立叶变换红外线色谱仪(FTIR) 测得其主要成分为碳酸盐羟磷灰石。能量色散 X 线微量分析(EDX) 发现纳米菌矿化外壳中主要是钙、磷成分, 这与结石的成分相似。 商品化羟基磷灰石 纳米细菌 能量色散X线微量分析（EDX）法检测钙磷峰 粘附在培养管底的纳米菌 图 A 的 Hoechst 染色 纳米菌的负染色 透射电镜 Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95: 8274–8279, 1998 200 nm 纳米菌扫描电镜图 分裂中的纳米菌 外附一层磷灰石 纳米菌包埋 在磷灰石中 Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95: 8274–8279, 1998 1um 100nm 1um 200nm A.平板上的纳米菌菌落 B. 在A中箭头所指的菌落（40X) C. 菌落周围针样磷灰石结晶