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- 2018-05-11 发布于河南
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实 验酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定 一、实验目的与要求 观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。 学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。 二、实验原理 酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物,菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂,无性繁殖主要是出芽生殖,仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖;有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色制成水浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。 美蓝是一种无毒性染料,它的氧化型是蓝色的,而还原型是无色的,用它来对酵母的活细胞进行染色,由于细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色,而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态,还可以区分死、活细胞。但美蓝的浓度、作用时间等均有影响,应加注意。 三、器材 菌种:啤酒酵母;假丝酵母;裂殖酵母 溶液和试剂:0.05%和0.1%吕氏碱性美蓝染液; 显微镜,载玻片,盖玻片等。 四、操作步骤 1.美蓝浸片观察 (1) 在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液,液滴不可过多或过少,以免盖上盖玻片时,溢出或留有气泡。然后按无菌操作法取在斜面上培养48小时的酿酒酵母少许,放在吕氏碱性美蓝染液中,使菌体与染液均匀混合。 (2) 用镊子夹盖玻片一块,小心地盖在液滴上。盖片时应注意,应先将盖玻片的一边与液滴接触,然后将整个盖玻片慢慢放下,这样可以避免产生气泡。 (3) 将制好的水浸片放置3分钟后镜检。先用低倍镜观察,然后换用高倍镜观察酿酒酵母的形态和出芽情况,同时可以根据是否染上颜色来区别死、活细胞。 (4) 染色半小时后,再观察一下死细胞数是否增加。 (5) 用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述的操作。 五、实验报告 1、结果 绘图说明你 所观察到的酵母菌的形态特征。 2、思考题 吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响?试分析其原因? 实 验 放线菌的形态观察 实验目的: 学习丝状微生物制片和染色技术; 观察和掌握典型放线菌的形态结构特征 一、实验材料 已培养皿上标记为准 插片法放线菌形态观察 接种 插片 倒置培养 镜检;取出盖玻片,搽去背面培养物,有菌面朝上放在载玻片上,直接在低倍镜和高倍镜下观察。 实 验 霉菌的形态观察 一、实验目的与要求 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法 了解四类常见霉菌的基本形态 二、实验原理 霉菌可产生分枝的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要特征。 观察霉菌的形态有多种方法:直接制片观察法,载玻片培养观察法和玻璃纸培养观察法。 三、器材 菌种:曲霉(Aspergillussp.),青霉(Penicillium sp.),根霉(Rhizopus sp.),毛霉(Mucor sp.) 试剂与仪器:乳酸石炭酸棉蓝染色液,20%甘油,查氏培养基平板,马铃薯培养基;显微镜,载玻片,盖玻片,解剖针,尖头镊子等。 四、操作步骤 在洁净载玻片上,滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液,用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝置染色液中,再细心地将菌丝挑散开,然后小心地盖上盖玻片,注意不要产生气泡。置显微镜下先用低倍镜观察,必要时再换高倍镜。 五、实验报告 1、结果 绘图说明四种霉菌的形态特征。 2、思考题 你主要根据那些形态特征来区分上述四种霉菌? 无性繁殖: 孢子囊梗直接从菌丝体上发出,单生或分枝,顶端产生膨大的孢子囊,孢子囊为球形,囊壁上常有针状的草酸钙结晶。在囊轴与孢子囊梗相连处无囊托,但孢子囊壁破裂时,留有残迹—囊领。 (二)根霉(Rhizopus): * * * 放线菌形态结构 是一类具有丝状分枝细胞的革兰氏阳性细菌,因菌落呈放射状而得名。 放线菌的形态和大小 放线菌呈分枝丝状 菌丝无隔膜,单细胞 菌丝直径与细菌相似,小于1微米 放线菌菌丝形态和功能 菌丝形态和功能的不同,放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种 ???????????????????????????????????? ?????????????????????????????????? 产生无性孢子是放线菌主要的繁殖方式。 南昌大学生物基础实验中心 霉菌的代表属 (一)毛霉(Mucor) 1.形态特征:菌丝发达、繁密;白色无隔多核,为单细胞真菌。 2.繁殖:可形成孢囊孢子、厚垣孢子、接合孢子。 毛 霉 与毛霉同属接合菌纲毛霉目。 1. 形态特征: 与毛
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