酶细胞化学的摘要.pptVIP

第二部分 细胞化学技术 cytochemistry * 细胞化学技术是在保持细胞结构完整的条件下，借助细胞中的化学反应在原位确定化学成分的分布及这些成分在细胞活动中的动态变化的技术 细胞化学是组织化学和细胞化学的统称 （ 组织化学 强调光镜水平的应用） （ 细胞化学 强调在电镜水平的应用） 细胞化学技术包括： 酶细胞化学技术 免疫细胞化学技术 原位杂交技术 放射自显影技术等 * 第五章 酶细胞化学技术 酶细胞化学是用细胞化学的方法证明酶的存在和位置的技术 用酶细胞化学技术可显示酶在细胞内的定位用于研究细胞器的结构和功能，了解细胞器的相互关系和进行细胞鉴别并对某些代谢性疾病的诊断具有一定的作用 Enzyme cytochemistry * 细胞器 标志酶 内质网 核苷二磷酸酶 葡萄糖- 6- 磷酸酶 高尔基体 焦磷酸硫胺素酶 烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶 溶酶体 酸性磷酸酶 微体 过氧化氢酶 线粒体 细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶 细胞膜 核糖核苷磷酸酶（ATP酶）、碱性磷酸酶 各种细胞器的标志酶 * 一些疾病由于缺乏某种酶而使细胞内某些物质不能被消化，这些物质大量堆积在细胞内,使细胞和组织的正常功能受到障碍。常见的如：贮积病、I-细胞病、矽肺等 贮积病 是由于遗传缺陷导致先天性缺乏某种溶酶体酶,结果与酶相应的底物不能被消化而贮留在细胞内目前已知有40多种先天性贮积病.多数是粘多糖和糖脂在组织中贮积 I型糖原累积病 是一种葡萄糖6-磷酸脂酶缺陷所引起的代谢性疾病,主要病理变化是肝细胞内大量糖原颗粒堆积 * 第一节 酶细胞化学原理 一、酶反应特异性和酶的定位 二、酶细胞化学反应 三、酶和底物 四、捕捉反应 第二节 酶细胞化学方法 一、样品制备 二、基本实验过程 三、一些关键问题 * 酶反应的特异性：酶反应的特异性是它的底物特异 性，即酶只作用于它特有的底物 酶的定位：酶存在的特定部位称为酶的定位 二、酶细胞化学反应 酶细胞化学的原理是：在一定条件下，使组织细胞内的酶作用于其底物，再将酶反应的产物作为反应物质，在酶的作用部位进行捕捉，形成显微镜下可见的最终反应产物，从而间接地使酶可见，以证明酶在细胞和细胞器水平的定位 第一节 酶细胞化学原理 一、酶反应的特异性和酶的定位 * (1) 酶反应 相当于细胞内自然条件下发生的酶促反应 捕捉反应 为了使酶反应可见而人为造成 捕捉剂 酶＋底物 初级反应产物 最终反应产物 酶反应 捕捉反应 酶细胞化学反应过程 * 在生物化学中，酶被分成六大类: 水解酶 氧化还原酶 转移酶 裂合酶 合成酶 异构酶 通过特异底物来定位特异的酶,也