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天然药物化学成分系统预实验 ----邓世安版本 1．生物碱的鉴别 1）检品溶液的制备 取粉碎的中药样品约2 g，加蒸馏水20～30 ml，并滴加盐酸数滴使呈酸性，在60℃左右水浴上加热15分钟后过滤，滤液供做以下试验。 （2）生物碱类成份的鉴别 生物碱类成份除有少数例外，均与多种生物碱沉淀剂在酸性溶液中产生沉淀反应，操作如下： ①取上述酸水浸液四份，每份l ml左右，分别滴加碘化汞钾试剂，碘化铋钾试剂，苦味酸试剂，硅钨酸试剂。若四者均有或大多数有沉淀反应，表明本样品可能含有生物碱，再进行下项试验进一步识别。 ②取上述其余酸水浸液加Na2CO3溶液使呈碱性置分液漏斗中，加入乙醚约10 ml振摇，静置后分出醚层，再用乙醚8 ml如前提取，合并醚液，将醚液置分液漏斗中，加酸水液10 ml摇后静置分层，分出酸水液，再以酸水液5 ml如前提取，合并酸水液，取出酸提液四份，分别作以下沉淀反应： 碘化铋钾试剂（Dragendorff试剂）：酸提取液滴加碘化铋钾试剂，产生桔红色或红棕色沉淀。 b．碘化汞钾试剂（Mayer试剂）：提取液滴加碘化汞钾试剂，产生白色沉淀。 c．碘碘化钾试剂（Wagers试剂）：酸水提取液滴加碘化铋钾试剂，产生棕色沉淀． d．硅钨酸试剂：酸水提取液滴加硅钨酸试剂，产生淡黄色或灰白色沉淀。 此酸水提取液与以上四种试剂均（或大多数）产生沉淀反应，即预示本样品是含有生物碱。 备注：以上①、②沉淀反应的结果，如沉淀的多少以“＋＋＋”“＋＋”“+”表示，无沉淀产生则以“一”表示。若①项试验全呈负反应，可另选几种生物碱沉淀试剂进行试验，若仍为负反应时，则可否定样品中有生物碱存在。不必再进行②项试验。 2、苷类的鉴别 1．检品溶液的制备 中药水浸液：取中药碎块或粉末2 g加蒸馏水约20 ml，70℃左右水浴浸渍10分钟，过滤，滤液供鉴别用。 中药醇浸液：取中药碎块或粉末少许于三角瓶，加乙醇10 ml，在温水浴上浸渍10分钟，过滤，滤液供鉴别用。 α-去氧糖的鉴定 2．鉴别试验 （1）α－萘酚试验（Molish反应）： 取醇浸液l ml，加10％ α－萘酚醇液1滴，摇匀，沿管壁缓缓加入浓硫酸10滴，不振摇，观察两液界面间是否出现紫红色环（此反应试糖，苷类化合物，反应灵敏，若有微量滤纸纤维或中药粉末存在于溶液中，都会产生上述反应，故在过滤时应加以注意）。 （1）三氯化铁冰醋酸反应（Keller-kiliani反应）： 取醇提液经处理后的氯仿或醇液l ml，水浴上蒸干，残渣溶于冰醋酸2 ml中，加入1％三氯化铁乙醇液1滴，混合均匀，倾于干燥小试管中，再沿管壁缓缓加入等体积浓硫酸，静置，交界处显棕色（苷元），渐变为浅绿、蓝色，最后上面醋酸层全呈蓝色或蓝绿色（α－去氧糖）。 3.酚类的检出 取样品—滴，溶于lml乙醇中，加入1％三氯化铁醇液1～2滴，如显蓝紫（水中）或绿色（醇中），示有酚类。 4.内酯，香豆素的检出试剂 1）羟胺试剂（异羟肟酸铁试验） 取香豆素少许，加乙醇l ml溶解，加6滴盐酸羟胺的饱和乙醇液混匀后加入6滴氢氧化钾的饱和乙醇液，使其显强碱性，再转入试管中加温10分钟左右（有气泡产生）。冷却，用5％盐酸使呈弱酸性（pH6左右），倾入试管中，沿壁滴，10％三氯化铁溶液，约半分钟后出现紫色或加深（后消失）。 （此反应试酯、内酯、香豆素及其苷类，但用中药浸液试验反应结果不明显。） 5.黄酮类检出试剂 盐酸镁粉试剂 取醇浸液2 ml加浓盐酸2～3滴及镁粉少许，放置，产生红色反应。 三氯化铝试剂 将醇浸液滴于滤纸上，分别进行以下试验： ①先在紫外灯下观察荧光，然后喷1％ AlCl3试剂，再观察黄色荧光。（生成黄色络合物） 醋酸镁试剂 在试管中或点样于滤纸片上，加1%醋酸镁甲醇溶液，黄酮类呈黄色荧光，二氢黄酮类呈天蓝色荧光。 6.蒽醌类检出试剂 氢氧化钾试剂 取l ml乙醇提取液，加入l ml 10％KOH溶液，产生红色反应.（羟基蒽醌类的Borntragers反应） 醋酸镁试剂 取醇浸液1ml，加1滴或数滴1%醋酸镁乙醇溶液，观察颜色变化。 1个α-羟基，有其邻位羟基呈紫---蓝色 1个α-羟基，有其对位羟基呈红---紫色 1个α-羟基，有其间位羟基呈橙红---红色 只有1个α-羟基，或只有一个β--羟基，或两个羟基不同环的呈橙黄---橙色。 7.强心苷类检出试剂 1）3,5－二硝基苯甲酸(kedde)试剂 取l ml醇浸提液，加入碱性3,5－二硝基苯甲酸试剂3～4滴，产生红色或紫色反应。 碱性苦味酸(baljet)反应 取样品醇液l ml，加入碱性苦味酸试剂数滴，溶液呈现橙或橙红色。