第三章_非细胞型微生物3学时.pptVIP

研究历史 1892年俄国学者Ivanovsky首次发现烟草花叶病毒的感染因子能通过细菌过滤器。 1898年荷兰的Beijerinck将病原体命名叫virus； 1935年美国的Stanley首次提纯并结晶了TMV，随后英国的Bawden and Pirie证实该结晶只含核酸和蛋白质两种成分； 1952年Hershey and Chase证实噬菌体的遗传物质是DNA； 1971年Diener发现只含RNA一种成分的类病毒； 1981年Randles等又发现了拟病毒（卫星病毒）； 1982年Prusiner发现了只含蛋白质一种成分的朊病毒。 补充：病毒与其他微生物的区别要点 第一节 病毒的形态构造 球形 —二十面体对称（如腺病毒） 杆状 — 螺旋对称（如烟草花叶病毒） 蝌蚪状 — 复合对称（如大肠杆菌噬菌体） 球形 —　二十面体对称（腺病毒） 杆状 — 螺旋对称（烟草花叶病毒） 蝌蚪状 — 复合对称（大肠杆菌偶数噬菌体） 复合对称的代表——T偶数噬菌体 头部 颈部 颈环 颈须 尾部 尾鞘 尾管 基板 刺突 尾丝 图例：病毒核衣壳的构造模式图 第二节 病毒的增殖 从病毒感染细胞，进入细胞，到复制子代病毒后释放出来的全过程，称为复制周期（replication cycle）或增殖周期，也叫感染周期。  吸附 第三节 病毒的干扰现象 第四节 病毒的抵抗力与变异 第五节 病毒的培养 按病毒侵袭部位不同选择适当的接种途径：嗜神经病毒接种在小鼠的脑内。痘苗病毒和单纯疱疹病毒接种于家兔角膜。 SPF动物（Specefic pathogen Free, SPF ） 无特定病原体动物：指不携带潜在感染或条件致病菌，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物。 SPF动物的种群来源于无菌动物或剖腹产净化动物；常见SPF动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等。 图例：鸡胚接种示意图 根据细胞来源、染色体特征及传代次数，可分为三种类型： 原代细胞：动物组织经胰蛋白酶消化处理，使细胞分散而得到的细胞。 二倍体细胞：将长成单层的原代细胞消化分散成单个细胞，继续培养传代，其染色体数与原代细胞一样，保持其二倍染色体数目的细胞，称为二倍体细胞。 传代细胞：能在体外持续增殖传代的细胞，大多数由癌细胞或二倍体细胞突变而成。 第六节 病毒与细胞的相互作用 杀细胞感染 非杀细胞感染 引致持续感染，对细胞代谢无影响。 产生干扰素 正常单层A72细胞 CPE观察 正常单层A72细胞 phage ：a virus that is parasitic in bacteria; it uses the bacteriums machinery and energy to produce more phage until the bacterium is destroyed and phage is released to invade surrounding bacteria . 包涵体的性质 病毒成分的蓄积，如狂犬病毒的Negri氏体 大量晶格样排列的病毒颗粒组成，如腺病毒的包涵体 细胞变性的产物，不含病毒，如疱疹病毒的包涵体 一、类病毒 (Viroids) 类病毒是一类能感染某些植物致病的单链闭合环状的 RNA 分子。类病毒基因组小，分子量为 1 × 105 。 1971年Diener首次报道,引起马铃薯纺锤形块茎病(PSTD)的病原体只含RNA一种成分；PSTV的结构模型： 二、拟病毒（卫星因子） 必须依赖宿主细胞内共同感染的辅助性病毒才能复制的核酸分子，有的拟病毒也有外壳蛋白包裹，这些又称卫星病毒 (Satellite viruses）。 动物感染病毒后的4种结果 思考题 病毒的基本特征。 病毒与其他微生物的区别。 病毒的结构。 何谓病毒的复制与复制周期。 病毒的增值过程包括哪些阶段。 病毒的培养方法。 病毒毒力的测定方法。 亚病毒种类及各自的特点。 合胞体（syncytia）是病毒感染后导致感染细胞及相邻细胞细胞膜融合的产物，表现为若干细胞的相邻细胞膜消失，成为多核巨细胞。 能够使半数组织细胞在一定条件下发生细胞病变的病毒量。用于判定病毒的毒力。 50%组织细胞感染量（TCID50） （二）空斑试验 将适当浓度的病毒悬液加入单层细胞培养中，当病毒吸附细胞后，再覆盖一层融化的琼脂。病毒在细胞内复制后产生局限性病灶，病灶逐渐扩大，肉眼也能看见，此即空斑试验。 空斑是由一个感染性病毒粒子复制形成的，类似于细菌的菌落，称为空斑形成单位（PFU）。病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升含有的PFU来表示。 CELLS 空斑试验的用途： 1. 测定病毒数量 2. 纯化病毒 单个空斑作悬液，梯度稀释后再作空斑，可获得