dongbo分解纤维素的细菌的分离.pptVIP

【答案】　 (1)纤维素　碳源　选择　 (2)刚果红　 (3)①第一步灼烧接种环是防止接种环上有其他微生物而污染培养基；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落 ②划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种对环境造成污染 ③稀释涂布平板 8.（2004天津理综）淀粉酶可以通过微生物发酵生产，为了提高酶的产最，请你设计一个实验，利用诱变育种方法，获得产生淀粉酶较多的菌株。 ①写出主要实验步骤。 ②根据诱发突变率低和诱发突变不定向性的特点预期实验结果。 提示：生产菌株在含有淀粉的固体培养基上，随其生长可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈。 解析：这是一道以诱变育种、选择培养和鉴别培养等知识为载体的实验设计题，综合性强，难度较大。既要求学生掌握实验原理，也要求学生具备较强的实验设计的能力及对实验结果的预测和分析能力。 答案： ①主要实验步骤： 第一步：将培养好的生产菌株分两组。一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理做对照。 第二步：制备含淀粉的固体培养基。 第三步：把诱变组的大量菌株接种于多个含淀粉的固体培养基上，同时接种对照组，相同条件下培养。 第四步：比较两组菌株菌落周围透明圈的大小，选出透明圈变大的菌株。 ②预期实验结果： a．由于诱发突变率低，诱变组中绝大多数菌落周围的透明圈大小与对照组相同。 b．由于诱发突变不定向性，诱变组中极少数菌落周围的透明圈与对照组相比变大或变小。 * 专题二 微生物的培养与应用 课题3 分解纤维素的微生物的分离 生物选修1 关于纤维素，你还记得些什么？ 思考：纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植物每年产生的纤维素超过70亿吨，但却不会在地球上大量的积累，为什么？ 纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。 1、纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。 一、自学检测 2、棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 3、纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶， 4、纤维素酶如何起作用？ 纤维二糖 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纤维素 5、纤维素分解菌的筛选方法是 刚果红染色法 刚果红能与纤维素形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 6、为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，方法有______ 发酵和______ 发酵。 发酵产纤维素酶 液体 固体 ①取二支20mL的试管 实验：纤维素酶分解纤维素的实验 ②各加入一张滤纸条 ③各加入pH4.8，物质量为0.1mol/L的醋酸－醋酸钠缓冲液11ml和10ml 甲 乙 ④在乙试管中加入1mL纤维素酶 ⑤两支试管固定在锥形瓶中，放在 140r/min的摇床上振荡1h ⑥结果：乙试管的滤纸条消失 提示： 本实验的自变量是纤维素酶的有无，自变量的操纵方法是：在一支试管中添加适量（1mL）的纤维素酶溶液，在另一支试管不添加纤维素酶，但需加入等量的缓冲液，不能加入蒸馏水，否则会影响溶液的pH。 实验分析： 1、本实验的自变量是？如何保证单一变量？ 2、乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？ 3、实验目的是什么？ 二、合作探究 请你根据实验流程图和提供的三个资料以及“操作提示”，在思考有关问题的基础上，设计出一个详细的实验方案。 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布在鉴别纤 维素分解菌的培养基上 筛选产生透 明圈的菌落 1、去什么样的环境中土壤取样效果比较好？ 富含纤维素的环境中 树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。 如果找不到合适的环境，可以人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境，如将滤纸埋在土壤中， 如果找不到合适的环境该怎么办呢？ 选择培养基成分分析 培养基组成 提供主要的营养物质 纤维素粉 5g 碳源（能源） NaNO3 1g 氮源、无机盐 KCl 0.5g Na2HPO4·7H2O 1.2g KH2PO4 0.9g MgSO4 ·7H2O 0.5g 无机盐 酵母膏 0.5g 生长因子、碳源、氮源 水解酵素 0.5g 氮素、生长因子 溶解后，蒸馏水定容至1000mL 水 提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。 3、选择培养的培养基配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？