2019高考总复习生物（人教版）课时作业提升：第十一单元+现代生物科技专题+第36讲+基因工程+Word版含解析.docVIP

课时作业(三十六)　基因工程 (对应学生用书P337) 1．利用转基因技术可以生产出更多廉价的胰岛素，如图为转基因实验过程示意图，其中数字表示相应过程。天然大肠杆菌质粒一般含有LacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因；人工合成的大肠杆菌puc118质粒中除含有LacZ基因外，还含有氨苄青霉素抗性基因。若LacZ基因完整，便可表达出β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色，形成蓝色菌落；若LacZ基因中插入了外源基因，带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，将形成白色菌落。此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功。 (1)过程①②一般需要的限制性核酸内切酶主要是从____________中分离纯化出来的；过程③④需要____________酶。 (2)检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒。培养一段时间后出现三种类型：蓝色菌落、白色菌落、无菌落形成。成功导入重组质粒的菌落的表现是____________。 (3)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外，还应加入____________________等物质，用于筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。 (4)大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用____________处理细胞，使细胞处于一种________________的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。第二步是将____________与感受态细胞混合，在一定的温度下完成转化。 解析：分析题图可知，①②表示用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子；③④表示用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒；⑤表示将目的基因导入受体细胞；⑥表示培养增殖；⑦表示分离纯化；⑧表示扩大培养。(1)过程①②需要限制性核酸内切酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子，其主要是从原核生物中分离纯化出来的；过程③④需要DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒。(2)如果无菌落形成，说明目的基因插入氨苄青霉素抗性基因中，大肠杆菌不能生长；如果长出蓝色菌落，说明表达出β-半乳糖苷酶，LacZ基因完整，即自连的运载体puc118质粒导入受体大肠杆菌，但重组质粒没有导入；如果长出白色菌落，说明目的基因已插入LacZ基因，重组质粒已导入受体大肠杆菌。(3)结合题干信息“若LacZ基因完整，便可表达出β-半乳糖苷酶，并能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成篮色，形成蓝色菌落；若LacZ基因中插入了外源基因，带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，将形成白色菌落”“puc118质粒中除含有LacZ基因外，还含有氨苄青霉素抗性基因”可知，图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入IPTG、X-gal、氨苄青霉素等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。(4)大肠杆菌最常用的转化方法是：首先用Ca2＋处理细胞，使细胞处于一种能吸收环境中DNA分子的生理状态，这种状态的细胞被称作感受态细胞。然后将重组表达载体溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度条件下促进感受态细胞吸收DNA，完成转化过程。 答案：(1)原核生物　DNA连接　(2)白色菌落 (3)IPTG、X-gal、氨苄青霉素　(4)Ca2＋　能吸收周围环境中DNA分子　重组表达载体溶于缓冲液中 2．(2018·江苏联考)科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。图1是转基因抗冻番茄培育过程的示意图，图2为质粒、限制酶酶切图谱。鱼的抗冻蛋白基因不含图中限制酶识别序列，Ampr为抗氨苄青霉素基因，其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请回答下列问题： (1)为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒上的____________之后；图1中③、④依次表示番茄细胞组织培养过程中的____________过程。 (2)在构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割。在此实例中，应该选用限制酶____________切割。 (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有____________和____________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____________。 (4)若操作过程中先将Ⅰ导入农杆菌，为便于筛选成功导入Ⅰ的农杆菌，则作为受体的农杆菌应具有的特点是__________________________________________________。 (5)为了确定耐寒转基因番茄是否培育成功，既要用放射性同位素标记的____________作探针进行分子杂交检测，又要用____________的方法从个体水平鉴定番茄植株的耐寒性。 解析：(1)若要抗冻蛋白基因正确表达