重组SARSCoV S1蛋白抗原表位分析及抗原性检测【药学论文】.docVIP

药学论文-重组SARSCoV S1蛋白抗原表位分析及抗原性检测 ???????????????????? 作者：邵红伟，蓝东明，陈尚武，刘泽寰，黄树林 【摘要】? 目的 对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒（SARSCoV）刺突蛋白（Spike, S）S1段进行原核重组表达，并检测表达产物的抗原性。方法 对S1中的HLA抗原表位进行预测分析，根据分析结果选定用于重组表达的区段，利用pET21b载体进行原核表达，将产物纯化后利用SARS抗血清进行抗原性检测。结果 抗原表位分析表明，S1中包含有多个能够被HLA分子有效提呈的抗原表位，综合考虑表位肽的分布、重组表达的效率、重组蛋白的空间构象以及引物设计的优化等因素，选取S1中的关键区域259～565 aa进行原核重组表达，得到了包涵体形式的重组蛋白，经过纯化和复性，获得了纯度较高的可溶性S1蛋白；用SARS抗血清对此重组蛋白进行免疫学鉴定，表明该蛋白具有SARS特异的抗原性。结论 重组表达的S1蛋白具有较强的抗原性，为进一步的疫苗研究和抗体筛选奠定了基础。 【关键词】? SARS；S1蛋白；抗原表位；重组表达　　Abstract:Objective To express and confirm the antigenicity of the S1 fragment of spike protein of SARSCoV.Metho