核酸提取及琼脂糖电泳5.pdfVIP

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  • 2018-05-11 发布于江苏
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核酸提取及琼脂糖电泳 核酸是遗传信息的载体,是最重要 的生物信息分子,是分子生物学研 究的主要对象,因此核酸的提取是 分子生物学实验技术中最重要、最 基本的操作 。 DNA提取的几种方法  染色体DNA的提取  CTAB法  SDS法  其它 基因组DNA -CTAB法  CTAB法原理(植物DNA提取经典方法)  CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基 溴化铵),是一种阳离子去污剂,可溶解细胞膜,并与核酸形成复合 物。  该复合物在高盐溶液中(0.7mol/L NaCl)是可溶的,通过有机溶剂 抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离 出来。 注:CTAB溶液在低于15℃时会形成沉淀析出,因此在将其加入冰冷的 植物材料之前必须预热,且离心时温度不要低于15℃。 基因组DNA -CTAB法  CTAB提取缓冲液的经典配方 TrisTris--HClHCl EDTAEDTA 组份组份 ((pH8.0pH8.0 ((pH8.0pH8.0 NaClNaCl C

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