生物化学-蛋白质的结构.pptVIP

蛋白质高级结构 一条多肽链绕假象的中心轴旋转 ① 二面角：Φ= -57°,Ψ= - 47°，是一种右手螺旋。 ②每3.6个氨基酸绕一圈，螺距 0.54nm;每个氨基酸残基绕轴旋转100° ，沿轴上 升0.15nm ③ R侧链基团伸向螺旋的外侧。 ④ 氢键的取向几乎与中心轴平行。 ⑤ 肽键上C=O氧与它后面（C端）第四个残基上的N-H氢间形成氢键（ α13 ）。 ● R基较小，且不带电荷的氨基酸利于α—螺旋的形成。 如多聚丙氨酸在pH7的水溶液中自发卷曲成α-螺旋。 溶液的pH值决定了侧链是否带有电荷，由单一一种氨基酸构成的聚合物只有当侧链不带电荷时才能形成α-螺旋，相邻残基的侧链上带有同种电荷会产生静电排斥力从而阻止多肽链堆积成α-螺旋构象。 Lys侧链的pK为10.5，当pH值远远高于10.5时，多聚赖氨酸大多数侧链为不带电荷的状态，该多肽可能形成一种α-螺旋构象，在较低的pH值时带有许多正电荷的分子可能会呈现出一种伸展的构象。 不同来源胰岛素肽链中A8, A9, A10, B1, B2, B27 和B30 位置上的氨基酸残基(其它的氨基酸相同) 3、酶原（proenzyme）和 激素原(prohormone)的激活 定义：在体内处于无活性状态的酶前身物（酶原，proenzyme）或激素原(prohormone)在一定条件下被修饰转变成有活性的酶或激素的过程称酶原或激素原的激活。 2. 胰岛素原和胰岛素样品同时在SDS上 电泳。画出电泳的预期结果。 3.研究人员用胰岛素做蛋白质的变性复性实验。当通过透析去掉尿素和?-巯基乙醇后只有不到10% 的活性得到恢复。然而当用胰岛素原重复这个实验的时候100%的活性通过复性得到了恢复。解释这些实验结果。 4. 用胰岛素而不是用胰岛素原治疗糖尿病患者。你认为这是一个好主意吗? 当在高pO2情况下，如在肺部（大约100 Torr）时，肌红蛋白和血红蛋白对氧的亲和性都很高，两者几乎都被饱和了。 然而当处于低于大约50 Torr以下的pO2时，肌红蛋白对氧的亲和性明显要比血红蛋白对氧的亲和性高得多。 在肌肉等组织的毛细管内，由于pO2低（20－40 Torr），血红蛋白对氧的亲和性低，所以红细胞中血红蛋白载有的很多氧被释放出来，释放出来的氧都可被肌肉中的肌红蛋白结合。 肌红蛋白和血红蛋白对氧亲和性的差异形成了一个有效的将氧从肺转运到肌肉的氧转运系统。 T form R form 氧合作用显著改变Hb的四级结构，血红素铁的微小移动导致血红蛋白构象的转换（从T态→R态） T态（tense state）紧张态 R态（relaxed state）松驰态。 血红素中的二价铁原子在与氧结合的前后，并不发生价数的改变 别构（变构）效应是指含亚基的蛋白质分子由于一个亚基构象的改变而引起其余亚基以至整个分子构象、性质和功能发生变化的效应。 血红蛋白是别构蛋白，O2结合到一个亚基上以后，影响与其它亚基的相互作用。 增加CO2的浓度、降低pH能显著提高血红蛋白亚基间的协同效应，降低血红蛋白对O2的亲和力，促进O2的释放; 反之，高浓度的O2也能促使血红蛋白释放H+ 和CO2 。 5. H＋、CO2和DPG对血红蛋白结合氧的影响 1）波耳（Bohr）效应 H+和CO2促进HbO2释放O2 (pH7.6) (pH7.2) 2） 2，3一二磷酸甘油酸(BPG / DPG)对Hb氧合的影响 Or 2, 3 - Bisphosphoglycerate (BPG) BPG通过与Hb的两个β亚基形成盐键稳定了血红蛋白的脱氧态的构象，因而降低脱氧血红蛋白的氧亲和力，使血红蛋白的曲线向右偏移。 当没有BPG时，在氧分压大约为20Torr时，血红蛋白几乎被氧饱和了，不能将它结合的氧卸载给肌红蛋白。然而在等摩尔的BPG存在下，20Torr时只有三分之一的血红蛋白被氧饱和。 所以BPG的别构效应使得血红蛋白在组织中氧分压低的情况下可以将氧转给肌红蛋白。? 总之，各种蛋白质都有特定的空间构象，而特定的空间构象又与它们特定的生物学功能相适应，蛋白质的结构与功能是高度统一的。 八、蛋白质的分离、纯化和鉴定 盐析：在蛋白质的水溶液中，加入大量高浓度的强电解质盐如硫酸胺、氯化钠、硫酸钠等，使蛋白质从溶液中析出，称为蛋白质的盐析。 而低浓度的盐溶液加入蛋白质溶液中，会导致蛋白质的溶解度增加，该现象称为盐溶。 盐析的机理：破坏蛋白质的水化膜， 中和表面的净电荷。 2.有机溶剂沉淀法：在蛋白质溶液中，加