第十二章 色谱法导论（DZ）1.pptVIP

第十二章 色谱法引论 Generalization of chromatograph analysis 12.1 概述 （一）色谱分离过程和色谱法定义 （二）色谱的分类 （三）色谱发展历史 （四）色谱法的特点 色谱的定义 定义：色谱法就是一种分离方法，其利用物质在两相中的分配系数的微小差异进行分离。当互不相溶的两相做相对运动时，被测物质在两相之间进行连续多次分配，这样原来微小的分配差异被不断放大，从而使各组分得到分离，最终达到分离、分析或测定物质一些物理化学常数的目的。 （二）色谱的分类 1. 色谱过程中两相的物理状态分类 2. 色谱分离过程的作用原理分类 3. 色谱动力学过程分类 4. 固定相的物理特征分类 1. 色谱过程中两相的物理状态分类 （四）色谱法的特点 （1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。 （2） 灵敏度高 可以检测出μg/g (10-6)级甚至ng/g (10-9)级的物质量。 （3） 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 （4） 应用范围广 气相色谱：沸点低于350℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析和制备。 12.2 色谱流出曲线及有关术语 1、色谱流出曲线及色谱峰 2、保留值 3、区域宽度 4、从色谱流出曲线中所获得的信息 2、保留值 保留时间：以出峰时间表示的保留值 死时间(Dead time, t0) 不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，其流速与流动相的流速相近。据 t0 可求出流动相平均流速 3、区域宽度 用来衡量色谱峰宽度的参数，有三种表示方法： （1）标准偏差(?)： 即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。 （2）半峰宽(W1/2)： 色谱峰高一半处的宽度 W1/2 =2.354? （3）峰底宽(W)： W = 4 ? 12.3 色谱基本理论 （一）相平衡常数与保留值 （二）塔板理论 （三）速率理论 1.分配系数（K） 定义：描述组份在固定相和流动相间的分配过程或吸附-脱附过程的参数，称为分配系数。是指在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值 分配系数是由组分和固定相的热力学性质决定的，它是每一个溶质的特征值，与两相体积、柱管特性和所用仪器无关。 在气相色谱中与两个变量有关：固定相和温度 在液相色谱中与三个变量有关：固定相、流动相和温度。 2.分配比或容量因子（ k ） 定义：它是指在一定温度和压力下，组分在两相间分配达平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比。 其中Vm?V0，Vs为固定相体积。 k值：衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数。 k值：决定于组分及固定相热力学性质。 它不仅随柱温、柱压变化而变化，而且还与流动相及固定相的体积有关。 K、k与选择因子α的关系： 如果两组分的K或k值相等，则α=1，两个组分的色谱峰必将重合，说明无法实现分离。两组分的K或k值相差越大，则分离得越好。因此两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。 （二）塔板理论 1. 塔板理论的假设 2. 塔板理论的内容 3. 理论塔板高度和理论塔板数 4. 有效塔板高度和有效塔板数 5. 塔板理论的不足 1. 塔板理论的假设 (1) 在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到； (2) 将载气看作成脉动（间歇）过程； (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同 2. 塔板理论的内容 塔片理论将色谱过程比喻成蒸馏过程，而色谱柱被视为一系列平衡单元——理论塔板的结合 在色谱柱足够长，理论塔板高度充分小，并且物质在流动相和固定相之间的分配是显等温线性的条件下： （1）色谱流出曲线的数学表达式和谱带移动规律 （2）引出了表征柱效的塔片数和塔板高度的概念 （3）近似解释了柱长与理论塔板高度H对谱带扩展 的影响 3. 理论塔板高度和理论塔板数 若：色谱柱长：L， 塔板间距离（理论塔板高度）：H， 色谱柱的理论塔板数：n， 则三者的关系为： n = L / H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为： 4. 有效塔板高度和有效塔板数 组分在t0时间内不参与柱内分配。需引入有效塔板数和有效塔板高度： 5. 塔板理论的不足 色谱过程也不是分馏过程，所以塔片理论只是一个半经验的理论，其并没有阐述色谱过程中谱带扩展的实质。 塔片理论没有将理论塔板高度与色谱参数定量联系起来，无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。 塔板理论无法解释同一色