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- 2018-05-13 发布于江苏
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课题1DNA的粗提取与鉴定
DNA粗提取、分离与鉴定的原理 [自读教材·夯基础]
1.思路与方法
(1)思路:选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
(2)方法:利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.提取DNA的原理
(1)DNA的溶解性:
①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离的目的。
②DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质则溶于其中,利用这一原理可以将DNA与蛋白质进一步分离。
(2)DNA的耐受性:
①蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没有影响。
②大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温而发生变性,而DNA在80_℃以上才会变性。
③洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
3.DNA的鉴定
DNA+二苯胺蓝色
根据教材P54图5-1“DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线”,思考下列问题:
(1)描述DNA在NaCl溶液中溶解度的变化情况。
提示:在物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度最小。在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大。
(2)
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