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专题十五:生物技术实践之核心考点
[重温考纲] 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。4.利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。5.从生物材料中提取某些特定的成分。6.运用发酵加工食品的基本方法。
核心考点1 微生物的分离和培养
一、要点整合
1.理清培养基制备与微生物纯化技术
提醒 (1)为了确定培养基的灭菌是否合格,微生物学实验一般会设置空白对照:随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间,观察培养基上是否有菌落生成。
(2)观察菌落需用固体培养基,因此培养基要添加琼脂。
(3)倒平板的温度一般在50 ℃左右适宜,温度过高会烫手,温度过低培养基又会凝固。
(4)平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又防止皿盖上的水珠落入培养基,造成培养基污染。
(5)平板划线法只适用于微生物的提纯,不适合进行计数,并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。
(6)利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数:C/V×M(稀释倍数)。
(7)菌种用甘油管藏法长期保存,保存时菌液中常添加一定量的甘油。
2.微生物的分离与计数
(1)筛选微生物的“两”种选择培养基
①以尿素为唯一氮源的培养基:筛选尿素分解菌。
②富含纤维素的培养基:筛选纤维素分解菌。
(2)鉴别微生物的“两”种鉴别培养基
①添加酚红指示剂的培养基:尿素分解菌可使该培养基变红。
②添加刚果红的培养基:纤维素分解菌的菌落周围产生透明圈。
(3)微生物计数的“两”种方法
①直接计数法:显微镜直接计数法。
②间接计数法:稀释涂布平板法(活菌计数法),统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
二、考向设计
1.(2016·全国Ⅰ,39)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下:
①配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);
②制作无菌平板;
③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;
④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题:
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________________________。若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是________。
(2)步骤③中,实验组的操作是___________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法________(填“正确”或“不正确”)。
【答案】 (1)牛肉膏、蛋白胨 琼脂
(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间
(3)污染 不正确
【解析】 (1)牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白质的水解产物,都可以作为氮源;平板为固体培养基,故需要加入凝固剂琼脂。(2)实验探究的是教室内“不同高度空气”中微生物的分布,其中变量为不同高度,故需在不同高度下放置开盖平板。同时,为了保证单一变量,需要保证开盖放置时间一致。为了保证实验可靠性,需要设置多个平行组。(3)在完全正确的操作情况下,空白对照组中不应出现菌落。若出现菌落,表明操作过程中存在杂菌污染,属于实验失误,所有实验数据均不应采用。
2.(2017·全国Ⅰ,37)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:
(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生________________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是________________________________
____________________________________________________________________________,
但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是___________________________
________________________________________________________________________(答出两点即可)。
(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源
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