课程论文--香石竹快速繁殖技术研究.docVIP

考试 √ 考查 课程论文 姓名： 班级： 学号： 评分项目 分值 得分 文字表达 15分 综合应用基础理论 与专业知识的能力 40分 学术水平 30分 规范要求 15分 合计（100分） 繁殖技术研究摘要%升汞6min消毒处理可获得较好的试管苗。70%酒精30 s+0.1%升汞6 min较适宜于外植体消毒，在春季取材，顶芽分化优于茎段芽，在冬季取材，茎段芽分化优于顶芽。同时对国内一些进展进行一下汇总。 关键词外植体茎段研究进展 [1]。我国现已广泛栽培，近年来，随着国外优良品种的引进和栽培技术的逐步掌握，香石竹在中国种植面积成倍增加[2]。内大量生产以满足市场要求，国内外主要采用组织培养进行香石竹的快速繁殖。近年来，多花散枝香石竹正引起人们越来越浓的兴趣，受到消费者的青睐口[3-5]。为了满足市场需要，采用组织培养繁殖是很有必要的，目前已有大量文献报道有关香石竹组培快繁技术，但他们的研究主要以盆栽苗作为材料。该试验在前期研究的基础上，以市场上出售的切花为材料，取其顶芽[6-7]、茎段[7-9] 作为外植体，观察它们在离体培养中的反应，研究不同的取材部位分化形成苗的情况，以期提出采用切花材料作为外植体的适宜采集时间及消毒处理时间。由于切花取材方便经济，研究结果可为利用切花作为外植体进行快速繁殖提供一定的理论基础和试验基础。通过不同种类或不同激素浓度的配比，探讨香石竹的外植体诱芽、继代增殖及生根培养的最适培养基，为短期大量工厂化生产提供参考。 1 材料与方法 1．1 试验材料 从花卉店购买健康、长势良好且花色优美的香石竹花枝作为试验材料。 1．2 试验方法 1．2．1 选择最佳的取材时间 分别在春、冬两季在同一个花店选购由同一家种苗公司提供的香石竹切花。 1．2．2 选择最佳的消毒方法 前期处理：用刀片削取花枝的顶芽或带腋芽的茎段，认真洗刷并在自来水下流水冲洗3 h，洗衣粉浸泡10～15 min，之后用流水洗净残留的洗衣粉。后期处理：在超净工作台上转入无菌的广口瓶中，采用5种消毒时间处理，即(1)70％酒精20 S+0．1 升汞5 min；(2)70%酒精20 S+0．1 升汞6 min；(3)70%酒精30 s+0．1 升汞6 min；(4)70%酒精30 s+0．1 升汞7 min；(5)70%酒精20 s+0．1 升汞8 min。每个处理中经酒精浸泡后均用无菌水冲洗2次，每次1 min，经升汞消毒后用无菌水冲洗5～6次，每次1 min，处理期间不断摇晃广口瓶，使外植体与消毒剂充分接触，接种到MS+6-BA l.5 mg／L+NAA 0.1 mg／L培养基中，观察外植体存活及污染情况以找出适合最佳消毒方法。 1．2．3 选择最佳的外植体部位 分别在冬、春季的花枝上选取生长健壮、饱满的顶芽和茎段芽，即从顶端数起前2个芽记为顶芽，其余为茎段芽。在无菌条件下切成1．0～1．5 cm左右长度，经消毒后接种于MS+6-BA 1．5mg／L+NAA 0.1 mg／L中，培养时光强1 400 lx，每天光照12 h，温度(25±2)℃ 。主要观察对比春、冬季材料顶芽和茎段芽的萌发效果，培养7 d后统计污染数(率)、死亡数(率)、萌发数(率)和继代后的增殖数(率)。 2 结果与分析 2．1 不同的消毒时间对各外植体成活率及污染率的影响 在5个消毒处理中，不论是对顶芽还是茎段芽，以处理(3)70%酒精30 s+0．1％ 升汞6 min的消毒时间萌发率最高，均在80 以上，处理(1)的萌发率最低，不到30%；处理(2)、(4)、(5)的萌发率偏低，在38.5％～68.8%，从经济方面考虑，既浪费植物材料又消耗成本，达不到组培的萌发要求，因此不宜作为最佳的消毒处理。而且处理(2)在接种后15~25 d，茎段芽死亡率达85 以上，而顶芽死亡率接近100 。这可能与消毒时间过短，随着培养时间的延长污染进一步显现，处理(4)、(5)在接种20 d内也出现生长不良现象，这可能由于消毒时间过长，对外植体已经造成一定伤害，随着培养时间的延长伤害逐渐表现出来。笔者认为该试验的成活率还比较低，据报道，在使用培养基一致的情况下，香石竹的诱导率可达100 [10]，所以在后续的研究中还有待增加更多的消毒处理以便提高成活率及控制污染率。 2．2 不同季节取材对外植体离体培养成活率及芽诱导率的影响 在相同培养基上进行离体培养不同季节取材的顶芽和茎段芽，其芽诱导率见表2，对于冬季取材来说，茎段芽萌发的瓶数较顶芽的多，茎段芽诱导率为86.7% ，顶芽为81．3％，引起该结果的原因可能是由于顶芽比