第二节植物病原细菌致病相关基因及其克隆.pptVIP

第二节 植物病原细菌的致病相关基因 质粒是细菌染色体外基因组，也是环状DNA分子，并能独立复制。DNA分子量在106 u ～ 108 u，所携带基因比染色体少。但一般每个细菌菌体内包含1～多个质粒。 环状超螺旋（cccDNA)-线性-开环ocDNA。 在植物病原细菌中与致病功能相关的基因多是成簇排列或距离很近。 1 细菌致病相关基因克隆的策略和研究方法 1.1 基因克隆策略 由里及表的研究途径，创建突变体-通过基因标记和互补法获得基因，再推断其产物，并证明其致病。 （1）方法导向 （2）概念导向 （3）异源基因克隆法 1.2 突变诱变方法 （1） 物理诱变 紫外线（UV）、X射线和γ射线诱变；离子束诱变，离子束是元素的离子经高能加速器加速后获得的放射线；中子 （2）化学诱变 化学诱变剂：碱基类似物、亚硝酸如亚硝基(NTG）、丫定橙染料、烷化剂如甲基磺酸乙脂（EMS）等 （3） 转座子诱变 是指细菌中有些DNA顺序能在无充分同源的情况下，通过随机重组插入基因组DNA中。 转座因子包括插入顺序、转座子（Transposon,Tn)和Mu噬菌体。 A. 插入序列构成的复合转座子：分子量较小，没有表型效应的转座因子。（转座酶和重复序列） B. Tn3家族 C. 其它转座子。 ? 理想基因文库应具备的条件： （1）以一种稳定的形式含有基因组DNA的序列。 （2