生物化学：DNA的生物合成.pptVIP

第十一章 DNA的复制、修复和重组;本章重点与难点 重点：DNA复制的一般规律；参与DNA复制的有关酶类和蛋白质；DNA的复制过程；DNA损伤修复的方式。 难点：对DNA的半保留复制、半不连续复制的理解。;第一节 DNA的代谢 第二节 DNA复制的基本规律 第三节 参与DNA复制的酶 第四节 DNA的复制过程 第五节 DNA的修复 第六节 体内DNA重组过程;遗传的中心法则;遗传中心法则的补充;中心法则的提出对生物化学与分子生物学的研究有重要的指导作用，它预测了许多生物化学过程，推动了生物化学与分子生物学的迅速发展。;第一节 DNA的代谢;二、大肠杆菌遗传图;第二节 DNA复制的基本规律 （一般原理） Basic Rules of DNA Replication ;复制的方式 ——半保留复制(semi-conservative replication) 双向复制(bidirectional replication) 半不连续复制(semi-discontinuous replication) 需要引物(primer);一、DNA复制是半保留复制(semi-conservative replication);DNA以半保留方式进行复制，是在1958年由M. Meselson 和 F. Stahl 所完成的用同位素示踪标记加密度梯度离心技术实验所证明。;;;实验表明，DNA复制是一种半保留复制;按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。;原核生物复制时，DNA从原点 (复制的起始点，origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉(replication forks)，称为双向复制。 ;DNA复制的方式;真核生物每个染色体有多个复制原点，是多复制子的复制。 习惯上把两个相邻复制原点之间的距离定为一个复制子(replicon) 。复制子是能够独立完成复制的功能单位。 ;5’;三. DNA复制是半不连续复制;顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为先导链或领头链(leading strand)。 另一股链因为复制的方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长，这股不连续复制的链称为随后链或随从链(lagging strand)。复制中的不连续片段（约1000个核苷酸）称为冈崎片段(okazaki fragments，1968)。 先导链连续复制而随后链不连续复制，称为半不连续复制。 ;;四. 需要引物 DNA聚合酶不能从头合成一段新链，参与DNA复制的DNA聚合酶，必须以一段具有3’端自由羟基（3’-OH）??RNA作为引物(primer) ，才能开始聚合子代DNA链。 RNA引物的大小，在原核生物中通常为50～100个核苷酸，而在真核生物中约为10个核苷酸。RNA引物的碱基顺序，与其模板DNA的碱基顺序相配对。 ; 第二节 DNA复制的酶学 （DNA复制相关的酶和蛋白质） The Enzymology of DNA Replication;参与DNA复制的物质 ;一、复制的化学反应 ;聚合反应的特点;二、DNA聚合酶;5′ A G C T T C A G G A T A ? 3′ | | | | | | | | | | |;;1、原核生物的DNA聚合酶;DNA的主要复制酶;功能：是原核生物DNA复制延长中起催化作用的主要酶。 ;DNA聚合酶Ⅲ全酶;2、真核生物的DNA聚合酶;三、原核生物参与DNA聚合反应有关的其他酶类及蛋白质（DNA复制酶系统）;1. 解链酶 用于解开DNA双链，使埋藏在DNA双螺旋分子中的碱基对暴露出来作为模板，以合成新链。每解开一对碱基间的氢键，需消耗两分子ATP。;2、DNA拓扑异构酶(DNA topoisomerase) ;10;;3.引发酶(primase)又称引物合成酶，催化前导链和随后链冈崎片段引物的合成。和另外的6种蛋白质组成引发体（primosome）才起作用。 引发酶本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP），该酶以DNA为模板，聚合一段RNA短链引物(primer)，以提供自由的3-OH，使子代DNA链能够开始聚合。 ;4、DNA连接酶;DNA连接酶催化的条件是： ① 需一段DNA片段具有3’-OH，而另一段DNA片段具有5’-Pi基； ② 未封闭的缺口位于双链DNA中，其中有一条链是完整的； ③ 需要消耗能量。 ;5.单链结合蛋白（single strand binding protein, SSB） 又称螺旋反稳蛋白（HDP）。这是一些能够与单链DNA结